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GTP-Binding Protein Fragment , Gbeta,H2N-Cys-Glu-Gly-Asn-Val-Arg-Val-Ser-Arg-Glu-Leu-Ala-Gly-His-Thr-Gly-Tyr-COOH,H2N-CEGNVRVSRELAGHTGY-OH,杭州专肽生物的产品

GTP-Binding Protein Fragment , Gbeta

编号:176004

CAS号:

单字母:H2N-CEGNVRVSRELAGHTGY-OH

纠错
  • 编号:176004
    中文名称:GTP-Binding Protein Fragment , Gbeta
    英文名:GTP-Binding Protein Fragment , Gbeta
    单字母:H2N-CEGNVRVSRELAGHTGY-OH
    三字母:H2N

    N端氨基

    -Cys

    半胱氨酸

    -Glu

    谷氨酸

    -Gly

    甘氨酸

    -Asn

    天冬酰胺

    -Val

    缬氨酸

    -Arg

    精氨酸

    -Val

    缬氨酸

    -Ser

    丝氨酸

    -Arg

    精氨酸

    -Glu

    谷氨酸

    -Leu

    亮氨酸

    -Ala

    丙氨酸

    -Gly

    甘氨酸

    -His

    组氨酸

    -Thr

    苏氨酸

    -Gly

    甘氨酸

    -Tyr

    酪氨酸

    -OH

    C端羧基

    氨基酸个数:17
    分子式:C76H122N26O26S1
    平均分子量:1848.01
    精确分子量:1846.87
    等电点(PI):11.16
    pH=7.0时的净电荷数:3.18
    平均亲水性:0.13571428571429
    疏水性值:-0.58
    外观与性状:白色粉末状固体
    消光系数:1490
    来源:人工化学合成,仅限科学研究使用,不得用于人体。
    纯度:95%、98%
    盐体系:可选TFA、HAc、HCl或其它
    生成周期:2-3周
    储存条件:负80℃至负20℃
    标签:GTP结合蛋白片段   

  • 多肽H2N-Cys-Glu-Gly-Asn-Val-Arg-Val-Ser-Arg-Glu-Leu-Ala-Gly-His-Thr-Gly-Tyr-COOH的合成步骤:

    1、合成CTC树脂:称取1.44g CTC Resin(如初始取代度约为0.54mmol/g)和0.93mmol Fmoc-Tyr(tBu)-OH于反应器中,加入适量DCM溶解氨基酸(需要注意,此时CTC树脂体积会增大好几倍,避免DCM溶液过少),再加入2.33mmol DIPEA(Mw:129.1,d:0.740g/ml),反应2-3小时后,可不抽滤溶液,直接加入1ml的HPLC级甲醇,封端半小时。依次用DMF洗涤2次,甲醇洗涤1次,DCM洗涤一次,甲醇洗涤一次,DCM洗涤一次,DMF洗涤2次(这里使用甲醇和DCM交替洗涤,是为了更好地去除其他溶质,有利于后续反应)。得到  Fmoc-Tyr(tBu)-CTC Resin。结构图如下:

    2、脱Fmoc:加3倍树脂体积的20%Pip/DMF溶液,鼓氮气30分钟,然后2倍树脂体积的DMF 洗涤5次。得到 H2N-Tyr(tBu)-CTC Resin 。(此步骤脱除Fmoc基团,茚三酮检测为蓝色,Pip为哌啶)。结构图如下:

    3、缩合:取2.33mmol Fmoc-Gly-OH 氨基酸,加入到上述树脂里,加适当DMF溶解氨基酸,再依次加入4.67mmol DIPEA,2.22mmol HBTU。反应30分钟后,取小样洗涤,茚三酮检测为无色。用2倍树脂体积的DMF 洗涤3次树脂。(洗涤树脂,去掉残留溶剂,为下一步反应做准备)。得到Fmoc-Gly-Tyr(tBu)-CTC Resin。氨基酸:DIPEA:HBTU:树脂=3:6:2.85:1(摩尔比)。结构图如下:

    4、依次循环步骤二、步骤三,依次得到

    H2N-Gly-Tyr(tBu)-CTC Resin

    Fmoc-Thr(tBu)-Gly-Tyr(tBu)-CTC Resin

    H2N-Thr(tBu)-Gly-Tyr(tBu)-CTC Resin

    Fmoc-His(Trt)-Thr(tBu)-Gly-Tyr(tBu)-CTC Resin

    H2N-His(Trt)-Thr(tBu)-Gly-Tyr(tBu)-CTC Resin

    Fmoc-Gly-His(Trt)-Thr(tBu)-Gly-Tyr(tBu)-CTC Resin

    H2N-Gly-His(Trt)-Thr(tBu)-Gly-Tyr(tBu)-CTC Resin

    Fmoc-Ala-Gly-His(Trt)-Thr(tBu)-Gly-Tyr(tBu)-CTC Resin

    H2N-Ala-Gly-His(Trt)-Thr(tBu)-Gly-Tyr(tBu)-CTC Resin

    Fmoc-Leu-Ala-Gly-His(Trt)-Thr(tBu)-Gly-Tyr(tBu)-CTC Resin

    H2N-Leu-Ala-Gly-His(Trt)-Thr(tBu)-Gly-Tyr(tBu)-CTC Resin

    Fmoc-Glu(OtBu)-Leu-Ala-Gly-His(Trt)-Thr(tBu)-Gly-Tyr(tBu)-CTC Resin

    H2N-Glu(OtBu)-Leu-Ala-Gly-His(Trt)-Thr(tBu)-Gly-Tyr(tBu)-CTC Resin

    Fmoc-Arg(Pbf)-Glu(OtBu)-Leu-Ala-Gly-His(Trt)-Thr(tBu)-Gly-Tyr(tBu)-CTC Resin

    H2N-Arg(Pbf)-Glu(OtBu)-Leu-Ala-Gly-His(Trt)-Thr(tBu)-Gly-Tyr(tBu)-CTC Resin

    Fmoc-Ser(tBu)-Arg(Pbf)-Glu(OtBu)-Leu-Ala-Gly-His(Trt)-Thr(tBu)-Gly-Tyr(tBu)-CTC Resin

    H2N-Ser(tBu)-Arg(Pbf)-Glu(OtBu)-Leu-Ala-Gly-His(Trt)-Thr(tBu)-Gly-Tyr(tBu)-CTC Resin

    Fmoc-Val-Ser(tBu)-Arg(Pbf)-Glu(OtBu)-Leu-Ala-Gly-His(Trt)-Thr(tBu)-Gly-Tyr(tBu)-CTC Resin

    H2N-Val-Ser(tBu)-Arg(Pbf)-Glu(OtBu)-Leu-Ala-Gly-His(Trt)-Thr(tBu)-Gly-Tyr(tBu)-CTC Resin

    Fmoc-Arg(Pbf)-Val-Ser(tBu)-Arg(Pbf)-Glu(OtBu)-Leu-Ala-Gly-His(Trt)-Thr(tBu)-Gly-Tyr(tBu)-CTC Resin

    H2N-Arg(Pbf)-Val-Ser(tBu)-Arg(Pbf)-Glu(OtBu)-Leu-Ala-Gly-His(Trt)-Thr(tBu)-Gly-Tyr(tBu)-CTC Resin

    Fmoc-Val-Arg(Pbf)-Val-Ser(tBu)-Arg(Pbf)-Glu(OtBu)-Leu-Ala-Gly-His(Trt)-Thr(tBu)-Gly-Tyr(tBu)-CTC Resin

    H2N-Val-Arg(Pbf)-Val-Ser(tBu)-Arg(Pbf)-Glu(OtBu)-Leu-Ala-Gly-His(Trt)-Thr(tBu)-Gly-Tyr(tBu)-CTC Resin

    Fmoc-Asn(Trt)-Val-Arg(Pbf)-Val-Ser(tBu)-Arg(Pbf)-Glu(OtBu)-Leu-Ala-Gly-His(Trt)-Thr(tBu)-Gly-Tyr(tBu)-CTC Resin

    H2N-Asn(Trt)-Val-Arg(Pbf)-Val-Ser(tBu)-Arg(Pbf)-Glu(OtBu)-Leu-Ala-Gly-His(Trt)-Thr(tBu)-Gly-Tyr(tBu)-CTC Resin

    Fmoc-Gly-Asn(Trt)-Val-Arg(Pbf)-Val-Ser(tBu)-Arg(Pbf)-Glu(OtBu)-Leu-Ala-Gly-His(Trt)-Thr(tBu)-Gly-Tyr(tBu)-CTC Resin

    H2N-Gly-Asn(Trt)-Val-Arg(Pbf)-Val-Ser(tBu)-Arg(Pbf)-Glu(OtBu)-Leu-Ala-Gly-His(Trt)-Thr(tBu)-Gly-Tyr(tBu)-CTC Resin

    Fmoc-Glu(OtBu)-Gly-Asn(Trt)-Val-Arg(Pbf)-Val-Ser(tBu)-Arg(Pbf)-Glu(OtBu)-Leu-Ala-Gly-His(Trt)-Thr(tBu)-Gly-Tyr(tBu)-CTC Resin

    H2N-Glu(OtBu)-Gly-Asn(Trt)-Val-Arg(Pbf)-Val-Ser(tBu)-Arg(Pbf)-Glu(OtBu)-Leu-Ala-Gly-His(Trt)-Thr(tBu)-Gly-Tyr(tBu)-CTC Resin

    Fmoc-Cys(Trt)-Glu(OtBu)-Gly-Asn(Trt)-Val-Arg(Pbf)-Val-Ser(tBu)-Arg(Pbf)-Glu(OtBu)-Leu-Ala-Gly-His(Trt)-Thr(tBu)-Gly-Tyr(tBu)-CTC Resin

    以上中间结构,均可在专肽生物多肽计算器-多肽结构计算器中,一键画出。

    最后再经过步骤二得到 H2N-Cys(Trt)-Glu(OtBu)-Gly-Asn(Trt)-Val-Arg(Pbf)-Val-Ser(tBu)-Arg(Pbf)-Glu(OtBu)-Leu-Ala-Gly-His(Trt)-Thr(tBu)-Gly-Tyr(tBu)-CTC Resin,结构如下:

     

    5、切割:6倍树脂体积的切割液(或每1g树脂加8ml左右的切割液),摇床摇晃 2小时,过滤掉树脂,用冰无水乙醚沉淀滤液,并用冰无水乙醚洗涤沉淀物3次,最后将沉淀物放真空干燥釜中,常温干燥24小试,得到粗品H2N-Cys-Glu-Gly-Asn-Val-Arg-Val-Ser-Arg-Glu-Leu-Ala-Gly-His-Thr-Gly-Tyr-COOH。结构图见产品结构图。

    切割液选择:1)TFA:H2O=95%:5%

    2)TFA:H2O:TIS=95%:2.5%:2.5%

    3)三氟乙酸:茴香硫醚:1,2-乙二硫醇:苯酚:水=87.5%:5%:2.5%:2.5%:2.5%

    (前两种适合没有容易氧化的氨基酸,例如Trp、Cys、Met。第三种适合几乎所有的序列。)

    6、纯化冻干:使用液相色谱纯化,收集目标峰液体,进行冻干,获得蓬松的粉末状固体多肽。不过这时要取小样复测下纯度 是否目标纯度。

    7、最后总结:

    杭州专肽生物技术有限公司(ALLPEPTIDE https://www.allpeptide.com)主营定制多肽合成业务,提供各类长肽,短肽,环肽,提供各类修饰肽,如:荧光标记修饰(CY3、CY5、CY5.5、CY7、FAM、FITC、Rhodamine B、TAMRA等),功能基团修饰肽(叠氮、炔基、DBCO、DOTA、NOTA等),同位素标记肽(N15、C13),订书肽(Stapled Peptide),脂肪酸修饰肽(Pal、Myr、Ste),磷酸化修饰肽(P-Ser、P-Thr、P-Tyr),环肽(酰胺键环肽、一对或者多对二硫键环),生物素标记肽,PEG修饰肽,甲基化修饰肽等。

    以上所有内容,为专肽生物原创内容,请勿发布到其他网站上。

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