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159147-88-3,抗氧化肽A、Antioxidant peptide A,H2N-Pro-His-Cys-Lys-Arg-Met-COOH,H2N-PHCKRM-OH,杭州专肽生物的产品

抗氧化肽A、Antioxidant peptide A

PHCKRM shows scavenging abilities against active oxygen species such as superoxide and hydroxyl radical. Thus, it acts as an antioxidant that could have a therapeutic effect against diseases (e.g. arthritis and cancer) which may be associated with hydroxy

编号:175961

CAS号:159147-88-3

单字母:H2N-PHCKRM-OH

纠错
  • 编号:175961
    中文名称:抗氧化肽A、Antioxidant peptide A
    英文名:Antioxidant peptide A
    CAS号:159147-88-3
    单字母:H2N-PHCKRM-OH
    三字母:H2N

    N端氨基

    -Pro

    脯氨酸

    -His

    组氨酸

    -Cys

    半胱氨酸

    -Lys

    赖氨酸

    -Arg

    精氨酸

    -Met

    甲硫氨酸

    -OH

    C端羧基

    氨基酸个数:6
    分子式:C31H54N12O7S2
    平均分子量:770.97
    精确分子量:770.37
    等电点(PI):-
    pH=7.0时的净电荷数:4.18
    酸性基团个数:2.05
    碱性基团个数:非常亲水
    平均亲水性:0.64
    疏水性值:-1.47
    外观与性状:白色粉末状固体
    闪点:0 M-1cm-1
    消光系数:-
    来源:人工化学合成,仅限科学研究使用,不得用于人体。
    纯度:95%、98%
    盐体系:可选TFA、HAc、HCl或其它
    储存条件:负80℃至负20℃
    标签:抗氧化肽   

  • Antioxidant peptide A 是一种短肽。作用于癌细胞时,Antioxidant peptide A 的侧链有助于增强自由基清除活性。
    Antioxidant peptide A is a short peptide, which contains alternative aromatic or sulfur-containing amino acid. The side chains of Antioxidant peptide A are believed to contribute to strong radical scavenging activities of peptides in the cancer cell.

    抗氧化肽
    活性氧(ROS)在促进线粒体细胞色素c释放和诱导细胞凋亡中起关键作用。抗氧化剂肽是细胞可渗透的,并且在减少细胞内ROS和防止氧化剂引起的细胞死亡方面非常有效。

    发现
    为了利用鱼类加工废料,使用不同的蛋白酶(alcalase,α-胰凝乳蛋白酶,中性酶,木瓜蛋白酶,胃蛋白酶和胰蛋白酶)水解金枪鱼骨架蛋白以产生抗氧化剂肽。Jae-Young J等人 在2007年使用脂质过氧化抑制测定法评估了水解产物的抗氧化活性,并通过电子自旋共振(ESR)光谱仪评估了直接清除自由基的活性。在水解物中,与其他水解物1相比,消化性水解物表现出最高的抗氧化活性Hee-Guk Byun等人, 2009年分析了来自轮虫Brachionus rotundiformis的蛋白质使用不同的蛋白酶(Alcalase,α-胰凝乳蛋白酶,Neutrase,木瓜蛋白酶,胃蛋白酶和胰蛋白酶)生产抗氧化剂肽。使用DPPH自由基清除活性评估了水解产物的抗氧化活性。与其他水解产物相比,消化性水解产物表现出最高的抗氧化活性2对虾日本对虾的肌肉被各种蛋白酶水解,Suetsuna K在2000 3检验了水解产物的抗氧化活性。 

    结构特征
    对应于细胞色素b558小亚基中His-94相邻区域的肽可在无细胞系统中抑制人类嗜中性白细胞产生超氧化物。该肽是显示抑制作用的最短序列。丙氨酸替代两个酪氨酸或中央缬氨酸残基均显着增加了抑制作用,表明这些残基的重要性4。 

    为了鉴定抗氧化肽,使用连续色谱法纯化了消化液,并将抗氧化肽鉴定为Leu-Leu-Gly-Pro-Gly-Leu-Thr-Asn-His-Ala(1076 Da)和Asp-Leu- Gly-Leu-Gly-Leu-Pro-Gly-Ala-His(1033 Da)通过Q-TOF ESI质谱法2检查了虾对虾的肌肉,并分析了水解产物的抗氧化活性。在消化液中,胃蛋白酶消化液显示出最有效的抗氧化活性。通过离子交换色谱,凝胶过滤和ODS高效液相色谱从活性肽级分中分离出三种抗氧化剂肽。它们的结构被鉴定为Ile-Lys-Lys,Phe-Lys-Lys和Phe-Ile-Lys-Lys 3。 

    行动方式
    ROS诱导线粒体内膜(IMM)上的心磷脂与细胞色素c分离,然后可以通过线粒体通透性转变(MPT)依赖性或MPT依赖性机制释放细胞色素c。我们已经开发出了针对IMM的肽类抗氧化剂,并用它们来研究ROS和MPT在叔丁基过氧化氢(tBHP)和3-硝基丙酸(3NP)引起的细胞死亡中的作用。这些肽的结构基序以交替的芳族和碱性氨基酸残基为中心,二甲基酪氨酸(Dmt)提供清除特性。这些肽类抗氧化剂可透过细胞,并在IMM中浓缩1000倍。它们有效地减少了神经元N2A细胞中由tBHP引起的细胞内ROS和细胞死亡(EC50〜nM)。它们还降低了线粒体ROS的产生,2+ 在孤立的线粒体中。

    功能

    衰老和疾病, 这些以IMM为目标的抗氧化剂在治疗衰老和与氧化应激相关的疾病4方面可能非常有益。 

    使用脂质过氧化抑制试验评估过 氧化抑制,水解产物的抗氧化活性,并使用电子自旋共振(ESR)光谱仪评估直接清除自由基的活性。在水解物中,与其他水解物1相比,消化性水解物显示出最高的抗氧化活性。 

    丙二醛水平 已被用作许多生物系统中的氧化指数。GLP在大鼠肝组织匀浆和线粒体膜过氧化系统中显示出显着的抗氧化活性。GLP也以剂量依赖的方式阻断了大鼠红细胞的自溶。根据这些结果,可以得出结论,GLP是负责灵芝抗氧化活性的主要成分GLP通过其抗氧化剂,金属螯合和自由基清除活性,在抑制生物系统中的脂质过氧化中起重要作用

    参考

    1.     Jae-Young J, Zhong-Ji Qian, Hee-Guk Byun, Se-Kwon Kim (2007). Purification and characterization of an antioxidant peptide obtained from tuna backbone protein by enzymatic hydrolysis. Process Biochemistry, 42(5):840-846.

    2.     Hee-Guk Byun, Jung Kwon Lee, Heum Gi Park, Joong-Kyun Jeon, Se-Kwon Kim (2009). Antioxidant peptides isolated from the marine rotifer, Brachionus rotundiformis. Process Biochemistry, 44(8):842-846.

    3.     Suetsuna K (2000). Antioxidant peptides from the protease digest of prawn (Penaeus japonicus) muscle. Journal Marine Biotechnology, 2(1):5-10.

    4.     Park MY, Imajoh-Ohmi S, Nunoi H, Kanegasaki S (1994). Peptides corresponding to the region adjacent to His-94 in the small subunit of cytochrome b558 inhibit superoxide generation in a cell-free system from human neutrophils. Biochem. Biophys. Res. Commun., 204(2):924-929.

  • DOI名称
    10.1186/s12645-016-0013-xBio-conjugation of antioxidant peptide on surface-modified gold nanoparticles: a novel approach to enhance the radical scavenging property in cancer cell下载
  • 多肽H2N-Pro-His-Cys-Lys-Arg-Met-COOH的合成步骤:

    1、合成CTC树脂:称取2.3g CTC Resin(如初始取代度约为0.74mmol/g)和2.04mmol Fmoc-Met-OH于反应器中,加入适量DCM溶解氨基酸(需要注意,此时CTC树脂体积会增大好几倍,避免DCM溶液过少),再加入5.11mmol DIPEA(Mw:129.1,d:0.740g/ml),反应2-3小时后,可不抽滤溶液,直接加入1ml的HPLC级甲醇,封端半小时。依次用DMF洗涤2次,甲醇洗涤1次,DCM洗涤一次,甲醇洗涤一次,DCM洗涤一次,DMF洗涤2次(这里使用甲醇和DCM交替洗涤,是为了更好地去除其他溶质,有利于后续反应)。得到  Fmoc-Met-CTC Resin。结构图如下:

    2、脱Fmoc:加3倍树脂体积的20%Pip/DMF溶液,鼓氮气30分钟,然后2倍树脂体积的DMF 洗涤5次。得到 H2N-Met-CTC Resin 。(此步骤脱除Fmoc基团,茚三酮检测为蓝色,Pip为哌啶)。结构图如下:

    3、缩合:取5.11mmol Fmoc-Arg(Pbf)-OH 氨基酸,加入到上述树脂里,加适当DMF溶解氨基酸,再依次加入10.21mmol DIPEA,4.85mmol HBTU。反应30分钟后,取小样洗涤,茚三酮检测为无色。用2倍树脂体积的DMF 洗涤3次树脂。(洗涤树脂,去掉残留溶剂,为下一步反应做准备)。得到Fmoc-Arg(Pbf)-Met-CTC Resin。氨基酸:DIPEA:HBTU:树脂=3:6:2.85:1(摩尔比)。结构图如下:

    4、依次循环步骤二、步骤三,依次得到

    H2N-Arg(Pbf)-Met-CTC Resin

    Fmoc-Lys(Boc)-Arg(Pbf)-Met-CTC Resin

    H2N-Lys(Boc)-Arg(Pbf)-Met-CTC Resin

    Fmoc-Cys(Trt)-Lys(Boc)-Arg(Pbf)-Met-CTC Resin

    H2N-Cys(Trt)-Lys(Boc)-Arg(Pbf)-Met-CTC Resin

    Fmoc-His(Trt)-Cys(Trt)-Lys(Boc)-Arg(Pbf)-Met-CTC Resin

    H2N-His(Trt)-Cys(Trt)-Lys(Boc)-Arg(Pbf)-Met-CTC Resin

    Fmoc-Pro-His(Trt)-Cys(Trt)-Lys(Boc)-Arg(Pbf)-Met-CTC Resin

    以上中间结构,均可在专肽生物多肽计算器-多肽结构计算器中,一键画出。

    最后再经过步骤二得到 H2N-Pro-His(Trt)-Cys(Trt)-Lys(Boc)-Arg(Pbf)-Met-CTC Resin,结构如下:

    5、切割:6倍树脂体积的切割液(或每1g树脂加8ml左右的切割液),摇床摇晃 2小时,过滤掉树脂,用冰无水乙醚沉淀滤液,并用冰无水乙醚洗涤沉淀物3次,最后将沉淀物放真空干燥釜中,常温干燥24小试,得到粗品H2N-Pro-His-Cys-Lys-Arg-Met-COOH。结构图见产品结构图。

    切割液选择:1)TFA:H2O=95%:5%、TFA:H2O=97.5%:2.5%

    2)TFA:H2O:TIS=95%:2.5%:2.5%

    3)三氟乙酸:茴香硫醚:1,2-乙二硫醇:苯酚:水=87.5%:5%:2.5%:2.5%:2.5%

    (前两种适合没有容易氧化的氨基酸,例如Trp、Cys、Met。第三种适合几乎所有的序列。)

    6、纯化冻干:使用液相色谱纯化,收集目标峰液体,进行冻干,获得蓬松的粉末状固体多肽。不过这时要取小样复测下纯度 是否目标纯度。

    7、最后总结:

    杭州专肽生物技术有限公司(ALLPEPTIDE https://www.allpeptide.com)主营定制多肽合成业务,提供各类长肽,短肽,环肽,提供各类修饰肽,如:荧光标记修饰(CY3、CY5、CY5.5、CY7、FAM、FITC、Rhodamine B、TAMRA等),功能基团修饰肽(叠氮、炔基、DBCO、DOTA、NOTA等),同位素标记肽(N15、C13),订书肽(Stapled Peptide),脂肪酸修饰肽(Pal、Myr、Ste),磷酸化修饰肽(P-Ser、P-Thr、P-Tyr),环肽(酰胺键环肽、一对或者多对二硫键环),生物素标记肽,PEG修饰肽,甲基化修饰肽

    以上所有内容,为专肽生物原创内容,请勿发布到其他网站上。

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