(Tyr⁶⁵,Phe⁶⁷)-C5a (65-74)是人C5a过敏毒素C末端区的类似物,在诱导形状变化(极化)和从人中性粒细胞(PMN)释放β-葡糖醛酸酶的能力方面表现为天然补体5a的完全激动剂。
编号:110551
CAS号:157952-15-3
单字母:H2N-YSFKDMQLGR-OH
编号: | 110551 |
中文名称: | 激动剂多肽(Tyr⁶⁵,Phe⁶⁷)-C5a (65-74) (human) |
英文名: | (Tyr⁶⁵,Phe⁶⁷)-C5a (65-74) (human) |
CAS号: | 157952-15-3 |
单字母: | H2N-YSFKDMQLGR-OH |
三字母: | H2N N端氨基 -Tyr酪氨酸 -Ser丝氨酸 -Phe苯丙氨酸 -Lys赖氨酸 -Asp天冬氨酸 -Met甲硫氨酸 -Gln谷氨酰胺 -Leu亮氨酸 -Gly甘氨酸 -Arg精氨酸 -OHC端羧基 |
氨基酸个数: | 10 |
分子式: | C55H85N15O16S1 |
平均分子量: | 1244.42 |
精确分子量: | 1243.6 |
等电点(PI): | 11.71 |
pH=7.0时的净电荷数: | 2.97 |
平均亲水性: | 0.055555555555556 |
疏水性值: | -0.9 |
消光系数: | 1490 |
来源: | 人工化学合成,仅限科学研究使用,不得用于人体。 |
储存条件: | 负80℃至负20℃ |
标签: | 未分类肽 |
(Tyr⁶⁵,Phe⁶⁷)-C5a (65-74)是人C5a过敏毒素C末端区的类似物,在诱导形状变化(极化)和从人中性粒细胞(PMN)释放β-葡糖醛酸酶的能力方面表现为天然补体5a的完全激动剂。
(Tyr⁶⁵,Phe⁶⁷)-C5a (65-74), analog of the human C5a anaphylatoxin C-terminal region, behaves like a full agonist of natural complement 5a in its ability to induce shape change (polarization) and the release of β-glucuronidase from human neutrophils (PMNs).
DOI | 名称 | |
---|---|---|
10.1074/jbc.M809396200 | Superoxide-mediated formation of tyrosine hydroperoxides and methionine sulfoxide in peptides through radical addition and intramolecular oxygen transfer | 下载 |
10.1038/nchembio.690 | GPCRs regulate the assembly of a multienzyme complex for purine biosynthesis | 下载 |
10.1021/jm00018a028 | Decapeptide agonists of human C5a: the relationship between conformation and neutrophil response | 下载 |
多肽H2N-Tyr-Ser-Phe-Lys-Asp-Met-Gln-Leu-Gly-Arg-COOH的合成步骤:
1、合成CTC树脂:称取0.97g CTC Resin(如初始取代度约为0.61mmol/g)和0.71mmol Fmoc-Arg(Pbf)-OH于反应器中,加入适量DCM溶解氨基酸(需要注意,此时CTC树脂体积会增大好几倍,避免DCM溶液过少),再加入1.78mmol DIPEA(Mw:129.1,d:0.740g/ml),反应2-3小时后,可不抽滤溶液,直接加入1ml的HPLC级甲醇,封端半小时。依次用DMF洗涤2次,甲醇洗涤1次,DCM洗涤一次,甲醇洗涤一次,DCM洗涤一次,DMF洗涤2次(这里使用甲醇和DCM交替洗涤,是为了更好地去除其他溶质,有利于后续反应)。得到 Fmoc-Arg(Pbf)-CTC Resin。结构图如下:
2、脱Fmoc:加3倍树脂体积的20%Pip/DMF溶液,鼓氮气30分钟,然后2倍树脂体积的DMF 洗涤5次。得到 H2N-Arg(Pbf)-CTC Resin 。(此步骤脱除Fmoc基团,茚三酮检测为蓝色,Pip为哌啶)。结构图如下:
3、缩合:取1.78mmol Fmoc-Gly-OH 氨基酸,加入到上述树脂里,加适当DMF溶解氨基酸,再依次加入3.55mmol DIPEA,1.69mmol HBTU。反应30分钟后,取小样洗涤,茚三酮检测为无色。用2倍树脂体积的DMF 洗涤3次树脂。(洗涤树脂,去掉残留溶剂,为下一步反应做准备)。得到Fmoc-Gly-Arg(Pbf)-CTC Resin。氨基酸:DIPEA:HBTU:树脂=3:6:2.85:1(摩尔比)。结构图如下:
4、依次循环步骤二、步骤三,依次得到
H2N-Gly-Arg(Pbf)-CTC Resin
Fmoc-Leu-Gly-Arg(Pbf)-CTC Resin
H2N-Leu-Gly-Arg(Pbf)-CTC Resin
Fmoc-Gln(Trt)-Leu-Gly-Arg(Pbf)-CTC Resin
H2N-Gln(Trt)-Leu-Gly-Arg(Pbf)-CTC Resin
Fmoc-Met-Gln(Trt)-Leu-Gly-Arg(Pbf)-CTC Resin
H2N-Met-Gln(Trt)-Leu-Gly-Arg(Pbf)-CTC Resin
Fmoc-Asp(OtBu)-Met-Gln(Trt)-Leu-Gly-Arg(Pbf)-CTC Resin
H2N-Asp(OtBu)-Met-Gln(Trt)-Leu-Gly-Arg(Pbf)-CTC Resin
Fmoc-Lys(Boc)-Asp(OtBu)-Met-Gln(Trt)-Leu-Gly-Arg(Pbf)-CTC Resin
H2N-Lys(Boc)-Asp(OtBu)-Met-Gln(Trt)-Leu-Gly-Arg(Pbf)-CTC Resin
Fmoc-Phe-Lys(Boc)-Asp(OtBu)-Met-Gln(Trt)-Leu-Gly-Arg(Pbf)-CTC Resin
H2N-Phe-Lys(Boc)-Asp(OtBu)-Met-Gln(Trt)-Leu-Gly-Arg(Pbf)-CTC Resin
Fmoc-Ser(tBu)-Phe-Lys(Boc)-Asp(OtBu)-Met-Gln(Trt)-Leu-Gly-Arg(Pbf)-CTC Resin
H2N-Ser(tBu)-Phe-Lys(Boc)-Asp(OtBu)-Met-Gln(Trt)-Leu-Gly-Arg(Pbf)-CTC Resin
Fmoc-Tyr(tBu)-Ser(tBu)-Phe-Lys(Boc)-Asp(OtBu)-Met-Gln(Trt)-Leu-Gly-Arg(Pbf)-CTC Resin
以上中间结构,均可在专肽生物多肽计算器-多肽结构计算器中,一键画出。
最后再经过步骤二得到 H2N-Tyr(tBu)-Ser(tBu)-Phe-Lys(Boc)-Asp(OtBu)-Met-Gln(Trt)-Leu-Gly-Arg(Pbf)-CTC Resin,结构如下:
5、切割:6倍树脂体积的切割液(或每1g树脂加8ml左右的切割液),摇床摇晃 2小时,过滤掉树脂,用冰无水乙醚沉淀滤液,并用冰无水乙醚洗涤沉淀物3次,最后将沉淀物放真空干燥釜中,常温干燥24小试,得到粗品H2N-Tyr-Ser-Phe-Lys-Asp-Met-Gln-Leu-Gly-Arg-COOH。结构图见产品结构图。
切割液选择:1)TFA:H2O=95%:5%、TFA:H2O=97.5%:2.5%
2)TFA:H2O:TIS=95%:2.5%:2.5%
3)三氟乙酸:茴香硫醚:1,2-乙二硫醇:苯酚:水=87.5%:5%:2.5%:2.5%:2.5%
(前两种适合没有容易氧化的氨基酸,例如Trp、Cys、Met。第三种适合几乎所有的序列。)
6、纯化冻干:使用液相色谱纯化,收集目标峰液体,进行冻干,获得蓬松的粉末状固体多肽。不过这时要取小样复测下纯度 是否目标纯度。
7、最后总结:
杭州专肽生物技术有限公司(ALLPEPTIDE https://www.allpeptide.com)主营定制多肽合成业务,提供各类长肽,短肽,环肽,提供各类修饰肽,如:荧光标记修饰(CY3、CY5、CY5.5、CY7、FAM、FITC、Rhodamine B、TAMRA等),功能基团修饰肽(叠氮、炔基、DBCO、DOTA、NOTA等),同位素标记肽(N15、C13),订书肽(Stapled Peptide),脂肪酸修饰肽(Pal、Myr、Ste),磷酸化修饰肽(P-Ser、P-Thr、P-Tyr),环肽(酰胺键环肽、一对或者多对二硫键环),生物素标记肽,PEG修饰肽,甲基化修饰肽
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