该技术的设计包括两个部分:a)一套带有翻译后修饰的赖氨酸遗传编码系统,可以在特定位点插入带修饰的赖氨酸。此外,在赖氨酸的主链上还带有光交联基团,可在UV光下与修饰相关的蛋白发生共价交联,可以用于研究该修饰特定的效应蛋白。b)一套带有保护基团的赖氨酸遗传编码系统,保护基团可以在大肠杆菌自身的还原性环境中发生脱除,将带有光交联基团的赖氨酸定点插入到组蛋白当中,用于证实交联到的效应蛋白的特异性。该团队以巴豆酰化修饰为代表,发展了该技术对应的赖氨酸巴豆酰化修饰的光交联探针(K*cr)和带有保护基团的光交联探针(PNBK*)两个探针,将这两种探针分别引入到组蛋白H3的56位和79位,并通过光交联基团捕捉到了H3上79位巴豆酰化的去巴豆酰化酶Sirt3。
北京大学陈鹏教授和香港大学李祥教授为本文的共同通讯作者;化学与分子工程学院14级博士生谢肖、香港大学13级博士生李小萌、生命科学联合中心15级博士生秦芳菲,为该文的共同第一作者。此项研究得到了国家自然科学基金委、科技部、北大-清华生命科学联合中心、香港协作研究金(CRF),香港优配研究金(GRF),杰出青年学者计划(ECS)的资助。
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