专肽生物_定制多肽合成服务_多肽合成定制服务_多肽合成厂家_多肽合成公司

该肽是一种p53肿瘤抑制蛋白，在Ras表达后在赖氨酸382处乙酰化，这对其生物学功能至关重要。赖氨酸382处的乙酰化特异性决定了PAb421表位。p53既是一种肿瘤抑制因子，又是一种转录因子，在被DNA损伤和其他细胞应激信号激活后，会导致触发细胞周期停滞、凋亡和DNA修复的基因转录

This peptide is a p53 tumor suppressor protein acetylated at lysine 382 upon Ras expression, an event that is essential for its biological function. Acetylation at lysine 382 specifically determines the PAb421 epitope. p53 acts as both a tumor-suppressor and transcription factor that, upon activation by DNA damage and other cellular stress signals, leads to the transcription of genes triggering cell-cycle arrest, apoptosis, and DNA repair

化学预防肽是有助于预防疾病（例如癌症或糖尿病）的发作或发展的肽。这些肽可以源自天然来源，例如大豆或牛奶，也可以来自肽模拟物的设计，也可以源自使用合成肽进行的肽筛选。据认为，这些肽中的某些可以充当细胞周期的调节剂，其调节使细胞通过复制周期前进所需的蛋白质的产生和功能。另外，现在有越来越多的证据表明特定的饮食模式，食物和饮料以及其他饮食物质可以而且确实可以预防癌症。越来越多的流行病学研究表明，食物，营养和身体活动在预防和改变癌症过程中很重要。包括植物蛋白酶抑制剂，乳铁蛋白，乳铁蛋白，凝集素和lunasin在内的不同类型的食物蛋白和多肽似乎起着化学预防剂的作用。如今，蛋白质和多肽被认为是一组营养保健品，在预防癌症的不同阶段（包括起始，促进和进展）方面显示出潜力。此外，已经发现在植物中发现的一些蛋白酶抑制剂，例如豆类和大豆，是有效的癌发生抑制剂。致癌作用是引发和促进癌症的过程。 Bowman-Birk抑制剂和Kunitz胰蛋白酶抑制剂就在其中。目前，这些化合物在致癌作用中的生物学功能主要归因于抑制癌细胞的侵袭和转移，但是，其作用机理仍不完全清楚，需要进一步研究以充分阐明它们。

多肽Ac-Gly-Gln-Ser-Thr-Ser-Arg-His-Lys-Lys(Ac)-Leu-Met-Phe-Lys-Thr-Glu-Gly-NH2的合成步骤：

1、合成MBHA树脂：取若干克MBHA树脂（如初始取代度为0.5mmol/g）和1倍树脂摩尔量的Fmoc-Linker-OH加入到反应器中，加入DMF，搅拌使氨基酸完全溶解。再加入树脂2倍量的DIEPA，搅拌混合均匀。再加入树脂0.95倍量的HBTU，搅拌混合均匀。反应3-4小时后，用DMF洗涤3次。用2倍树脂体积的10%乙酸酐/DMF 进行封端30分钟。然后再用DMF洗涤3次，甲醇洗涤2次，DCM洗涤2次，再用甲醇洗涤2次。真空干燥12小时以上，得到干燥的树脂{Fmoc-Linker-MHBA Resin}，测定取代度。这里测得取代度为 0.3mmol/g。结构如下图：

2、脱Fmoc：取2.72g的上述树脂，用DCM或DMF溶胀20分钟。用DMF洗涤2遍。加3倍树脂体积的20%Pip/DMF溶液，鼓氮气30分钟，然后2倍树脂体积的DMF 洗涤5次。得到 H2N-Linker-MBHA Resin 。（此步骤脱除Fmoc基团，茚三酮检测为蓝色，Pip为哌啶）。结构图如下：

3、缩合：取2.45mmol Fmoc-Gly-OH 氨基酸，加入到上述树脂里，加适当DMF溶解氨基酸，再依次加入4.9mmol DIPEA，2.33mmol HBTU。反应30分钟后，取小样洗涤，茚三酮检测为无色。用2倍树脂体积的DMF 洗涤3次树脂。（洗涤树脂，去掉残留溶剂，为下一步反应做准备）。得到Fmoc-Gly-Linker-MBHA Resin。氨基酸：DIPEA：HBTU：树脂=3：6：2.85：1（摩尔比）。结构图如下：

4、依次循环步骤二、步骤三，依次得到

H2N-Gly-Linker-MBHA Resin

Fmoc-Glu(OtBu)-Gly-Linker-MBHA Resin

H2N-Glu(OtBu)-Gly-Linker-MBHA Resin

Fmoc-Thr(tBu)-Glu(OtBu)-Gly-Linker-MBHA Resin

H2N-Thr(tBu)-Glu(OtBu)-Gly-Linker-MBHA Resin

Fmoc-Lys(Boc)-Thr(tBu)-Glu(OtBu)-Gly-Linker-MBHA Resin

H2N-Lys(Boc)-Thr(tBu)-Glu(OtBu)-Gly-Linker-MBHA Resin

Fmoc-Phe-Lys(Boc)-Thr(tBu)-Glu(OtBu)-Gly-Linker-MBHA Resin

H2N-Phe-Lys(Boc)-Thr(tBu)-Glu(OtBu)-Gly-Linker-MBHA Resin

Fmoc-Met-Phe-Lys(Boc)-Thr(tBu)-Glu(OtBu)-Gly-Linker-MBHA Resin

H2N-Met-Phe-Lys(Boc)-Thr(tBu)-Glu(OtBu)-Gly-Linker-MBHA Resin

Fmoc-Leu-Met-Phe-Lys(Boc)-Thr(tBu)-Glu(OtBu)-Gly-Linker-MBHA Resin

H2N-Leu-Met-Phe-Lys(Boc)-Thr(tBu)-Glu(OtBu)-Gly-Linker-MBHA Resin

Fmoc-Lys(Ac)-Leu-Met-Phe-Lys(Boc)-Thr(tBu)-Glu(OtBu)-Gly-Linker-MBHA Resin

H2N-Lys(Ac)-Leu-Met-Phe-Lys(Boc)-Thr(tBu)-Glu(OtBu)-Gly-Linker-MBHA Resin

Fmoc-Lys(Boc)-Lys(Ac)-Leu-Met-Phe-Lys(Boc)-Thr(tBu)-Glu(OtBu)-Gly-Linker-MBHA Resin

H2N-Lys(Boc)-Lys(Ac)-Leu-Met-Phe-Lys(Boc)-Thr(tBu)-Glu(OtBu)-Gly-Linker-MBHA Resin

Fmoc-His(Trt)-Lys(Boc)-Lys(Ac)-Leu-Met-Phe-Lys(Boc)-Thr(tBu)-Glu(OtBu)-Gly-Linker-MBHA Resin

H2N-His(Trt)-Lys(Boc)-Lys(Ac)-Leu-Met-Phe-Lys(Boc)-Thr(tBu)-Glu(OtBu)-Gly-Linker-MBHA Resin

Fmoc-Arg(Pbf)-His(Trt)-Lys(Boc)-Lys(Ac)-Leu-Met-Phe-Lys(Boc)-Thr(tBu)-Glu(OtBu)-Gly-Linker-MBHA Resin

H2N-Arg(Pbf)-His(Trt)-Lys(Boc)-Lys(Ac)-Leu-Met-Phe-Lys(Boc)-Thr(tBu)-Glu(OtBu)-Gly-Linker-MBHA Resin

Fmoc-Ser(tBu)-Arg(Pbf)-His(Trt)-Lys(Boc)-Lys(Ac)-Leu-Met-Phe-Lys(Boc)-Thr(tBu)-Glu(OtBu)-Gly-Linker-MBHA Resin

H2N-Ser(tBu)-Arg(Pbf)-His(Trt)-Lys(Boc)-Lys(Ac)-Leu-Met-Phe-Lys(Boc)-Thr(tBu)-Glu(OtBu)-Gly-Linker-MBHA Resin

Fmoc-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Arg(Pbf)-His(Trt)-Lys(Boc)-Lys(Ac)-Leu-Met-Phe-Lys(Boc)-Thr(tBu)-Glu(OtBu)-Gly-Linker-MBHA Resin

H2N-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Arg(Pbf)-His(Trt)-Lys(Boc)-Lys(Ac)-Leu-Met-Phe-Lys(Boc)-Thr(tBu)-Glu(OtBu)-Gly-Linker-MBHA Resin

Fmoc-Ser(tBu)-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Arg(Pbf)-His(Trt)-Lys(Boc)-Lys(Ac)-Leu-Met-Phe-Lys(Boc)-Thr(tBu)-Glu(OtBu)-Gly-Linker-MBHA Resin

H2N-Ser(tBu)-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Arg(Pbf)-His(Trt)-Lys(Boc)-Lys(Ac)-Leu-Met-Phe-Lys(Boc)-Thr(tBu)-Glu(OtBu)-Gly-Linker-MBHA Resin

Fmoc-Gln(Trt)-Ser(tBu)-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Arg(Pbf)-His(Trt)-Lys(Boc)-Lys(Ac)-Leu-Met-Phe-Lys(Boc)-Thr(tBu)-Glu(OtBu)-Gly-Linker-MBHA Resin

H2N-Gln(Trt)-Ser(tBu)-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Arg(Pbf)-His(Trt)-Lys(Boc)-Lys(Ac)-Leu-Met-Phe-Lys(Boc)-Thr(tBu)-Glu(OtBu)-Gly-Linker-MBHA Resin

Fmoc-Gly-Gln(Trt)-Ser(tBu)-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Arg(Pbf)-His(Trt)-Lys(Boc)-Lys(Ac)-Leu-Met-Phe-Lys(Boc)-Thr(tBu)-Glu(OtBu)-Gly-Linker-MBHA Resin

以上中间结构，均可在专肽生物多肽计算器-多肽结构计算器中，一键画出。

最后再经过步骤二得到 H2N-Gly-Gln(Trt)-Ser(tBu)-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Arg(Pbf)-His(Trt)-Lys(Boc)-Lys(Ac)-Leu-Met-Phe-Lys(Boc)-Thr(tBu)-Glu(OtBu)-Gly-Linker-MBHA Resin，结构如下：

5、乙酸酐反应连接：在上述树脂中，加入适当DMF后，再加入2.45mmol乙酸酐到树脂中，再加入4.9mmol DIPEA，鼓氮气反应30分钟。用2倍树脂体积的DMF 洗涤3次树脂（洗涤树脂，去掉残留溶剂，为下一步反应做准备）。 得到Ac-Gly-Gln(Trt)-Ser(tBu)-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Arg(Pbf)-His(Trt)-Lys(Boc)-Lys(Ac)-Leu-Met-Phe-Lys(Boc)-Thr(tBu)-Glu(OtBu)-Gly-Linker-MBHAResin。 结构如下：

6、切割：6倍树脂体积的切割液（或每1g树脂加8ml左右的切割液），摇床摇晃 2小时，过滤掉树脂，用冰无水乙醚沉淀滤液，并用冰无水乙醚洗涤沉淀物3次，最后将沉淀物放真空干燥釜中，常温干燥24小试，得到粗品Ac-Gly-Gln-Ser-Thr-Ser-Arg-His-Lys-Lys(Ac)-Leu-Met-Phe-Lys-Thr-Glu-Gly-NH2。结构图见产品结构图。

切割液选择：1）TFA：H2O=95%：5%

2）TFA：H2O：TIS=95%：2.5%：2.5%

3）三氟乙酸：茴香硫醚：1，2-乙二硫醇：苯酚：水=87.5%：5%：2.5%：2.5%：2.5%

（前两种适合没有容易氧化的氨基酸，例如Trp、Cys、Met。第三种适合几乎所有的序列。）

7、纯化冻干：使用液相色谱纯化，收集目标峰液体，进行冻干，获得蓬松的粉末状固体多肽。不过这时要取小样复测下纯度 是否目标纯度。

8、最后总结：

杭州专肽生物技术有限公司（ALLPEPTIDE https://www.allpeptide.com）主营定制多肽合成业务，提供各类长肽，短肽，环肽，提供各类修饰肽，如：荧光标记修饰（CY3、CY5、CY5.5、CY7、FAM、FITC、Rhodamine B、TAMRA等），功能基团修饰肽（叠氮、炔基、DBCO、DOTA、NOTA等），同位素标记肽（N15、C13），订书肽（Stapled Peptide）,脂肪酸修饰肽（Pal、Myr、Ste），磷酸化修饰肽（P-Ser、P-Thr、P-Tyr），环肽（酰胺键环肽、一对或者多对二硫键环），生物素标记肽，PEG修饰肽，甲基化修饰肽等。

以上所有内容，为专肽生物原创内容，请勿发布到其他网站上。