组蛋白片段用作蛋白质精氨酸甲基转移酶 PRMT4 的底物。
编号:118029
CAS号:2022956-67-6
单字母:H2N-ATKAAR-K(Me)2-SAPATGGVKKPHRYRPGG-K(Biotin)-OH
The histone fragment was used as substrate for the protein arginine methyltransferase PRMT4.
生物素可以与亲和素或者链霉亲和素有力结合,结合强度甚至接近共价键。生物素标记的肽通常用于免疫测定,组织细胞化学和基于荧光的流式细胞术。标记的抗生物素抗体也可以用来结合生物素化多肽。生物素标记常连接在赖氨酸侧链或者N末端。通常在多肽和生物素之间使用6-氨基己酸作为纽带,纽带能够灵活结合底物,并且在有空间位阻的情况下能结合地更好。专肽生物根据需求,向客户提供具有不同位点生物素标记多肽的定制合成。
专肽生物合成用于蛋白质-蛋白质相互作用研究的生物素化肽。尽管生物素可以在 N 端或 C 端引入(通过赖氨酸残基),但我们建议使用 N 端修饰,因为它成本低、成功率高、周转时间短且易于操作。因为多肽合成是从 C 端到 N 端合成的,因此,N 端修饰是 SPPS步骤的最后一步,不需要额外的特定缩合步骤。相比之下,C 端修饰需要额外的步骤,并且通常更复杂。当然,原则上生物素可以定位在任何地方。
生物素可以通过多种不同的接头或间隔物与肽分离。尽管如此,还是建议包含一个灵活的间隔物,例如 Ahx(一个 6 碳接头),以使生物素标签更加稳定或灵活。
专肽生物在 N 端或 C 端提供生物素化:生物素-N 端、赖氨酸-生物素-肽中间和赖氨酸-生物素-C 端。
专肽生物还可以使用 Ahx 接头或长碳 (LC) 接头提供生物素化:生物素-Ahx-N 末端、Lys-Ahx-生物素-肽中间、Lys-Ahx-生物素-C-末端。
(生物素结构)
示例:
GRGDS在N端和C端标记生物素的结构展示。
1、GRGDS在N端标记生物素,不增加Ahx 接头
2、GRGDS在N端标记生物素,增加一个Ahx 接头
3、GRGDS在C端标记生物素,不增加Ahx 接头
4、GRGDS在C端标记生物素,增加一个Ahx 接头。
甲基化修饰多肽
也叫甲基化标记多肽,甲基化修饰是在其他常见的翻译后修饰(PTMs)中生物和物理化学特性方面非常突出的一种修饰手段。几乎参与细胞所有的生命活动过程,发挥着重要的调控作用,蛋白质在甲基转移酶的催化下将甲基转移至特定的氨基酸残基上共价结合的过程。甲基化是一种可逆的修饰过程,由去甲基化酶催化去甲基化作用。可以发生在20个常见氨基酸残基中的至少9个(Met, Cys, Lys, Arg, His, Gln, Asn, Glu and Asp)氨基酸中,而最常见甲基化/去甲基化主要发生在赖氨酸(Lys)和精氨酸(Arg)侧链上,几乎参与生物所有的生命活动过程,如调节细胞功能,如转录、细胞分裂和细胞分化。甲基化修饰能够发生在不同的氨基酸位点,或是在同一个氨基酸位点产生不止一个甲基化修饰。
研究发现,常见甲基化/去甲基化作用的氨基酸主要是赖氨酸(Lys)和精氨酸(Arg)研究表明,组蛋白赖氨酸甲基化修饰执行着多种生物学功能,如干细胞的维持和分化、X染色体失活、转录调节和DNA损伤反应等,主要是影响染色质浓缩,抑制基因表达。组蛋白精氨酸甲基化在基因转录调控中发挥着重要作用,并能影响细胞的多种生理过程,包括DNA修复、信号转导、细胞发育及癌症发生等因此专肽生物特地开发甲基化修饰多肽技术,为科学家在蛋白质翻译后修饰(PTMS)的研究中提供帮助。
甲基化修饰(Me1,Me2,Me3)
采用高品质的Fmoc-Lys(Me,Boc)-OH、 Fmoc-Lys(Me2)-OH、Fmoc-Lys(Me3)-OH.HCL、Fmoc-Arg(Me,Pbf)-OH 、Fmoc-Arg(me)2-OH.HCl(asymmetrical) 、Fmoc-Arg(me)2-OH.HCl(symmetrical) 等原料,采用Fmoc固相合成工艺合成,得到Lys甲基化,Arg甲基化标记的多肽,使用HPLC 对产物进行纯化。最终产品提供相应的质谱图,纯度分析的HPLC 色谱图。
DOI | 名称 | |
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10.1093/nar/gkr1066 | MeCP2 binds to nucleosome free (linker DNA) regions and to H3K9/H3K27 methylated nucleosomes in the brain | 下载 |