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Adrenomedullin (16-31), human TFA 是人肾上腺髓质素 (hADM) 的 16-31 氨基酸片段。肾上腺髓质素对 CGRP1 受体具有明显的亲和力。Adrenomedullin (16-31), human TFA 对大鼠全身血管具有升压活性，但对猫没有作用活性。
Adrenomedullin (16-31), human TFA is amino acid residues 16-31 fragment of human adrenomedullin (hADM). Adrenomedullin has appreciable affinity for the CGRP1 receptor. Adrenomedullin (16-31), human TFA possesses pressor activity in the systemic vascular bed of the rat, but not the cat[1].

二硫键广泛存在与蛋白结构中，对稳定蛋白结构具有非常重要的意义，二硫键一般是通过序列中的2个Cys的巯基，经氧化形成。
 

形成二硫键的方法很多：空气氧化法，DMSO氧化法，过氧化氢氧化法等。
 

二硫键的合成过程，  可以通过Ellman检测以及HPLC检测方法对其反应进程进行监测。  
   

如果多肽中只含有1对Cys，那二硫键的形成是简单的。多肽经固相或液相合成，然后在pH8-9的溶液中进行氧化。      
 

当需要形成2对或2对以上的二硫键时，合成过程则相对复杂。尽管二硫键的形成通常是在合成方案的最后阶段完成，但有时引入预先形成的二硫化物是有利于连合或延长肽链的。通常采用的巯基保护基有trt, Acm, Mmt, tBu, Bzl, Mob, Tmob等多种基团。我们分别列出两种以2-Cl树脂和Rink树脂为载体合成的多肽上多对二硫键形成路线：
 

二硫键反应条件选择    
 

 二硫键即为蛋白质或多肽分子中两个不同位点Cys的巯基（-SH）被氧化形成的S-S共价键。 一条肽链上不同位置的氨基酸之间形成的二硫键，可以将肽链折叠成特定的空间结构。多肽分 子通常分子量较大，空间结构复杂，结构中形成二硫键时要求两个半胱氨酸在空间距离上接近。 此外，多肽结构中还原态的巯基化学性质活泼，容易发生其他的副反应，而且肽链上其他侧链 也可能会发生一系列修饰，因此，肽链进行修饰所选取的氧化剂和氧化条件是反应的关键因素， 反应机理也比较复杂，既可能是自由基反应，也可能是离子反应。      

反应条件有多种选择，比如空气氧化，DMSO氧化等温和的氧化过程，也可以采用H2O2，I2， 汞盐等激烈的反应条件。
 

空气氧化法： 空气氧化法形成二硫键是多肽合成中最经典的方法，通常是将巯基处于还原态的多肽溶于水中，在近中性或弱碱性条件下（PH值6.5-10），反应24小时以上。为了降低分子之间二硫键形成的可能，该方法通常需要在低浓度条件下进行。
 

碘氧化法：将多肽溶于25%的甲醇水溶液或30%的醋酸水溶液中，逐滴滴加10-15mol/L的碘进行氧化，反应15-40min。当肽链中含有对碘比较敏感的Tyr、Trp、Met和His的残基时，氧化条件要控制的更精确，氧化完后，立即加入维生素C或硫代硫酸钠除去过量的碘。 当序列中有两对或多对二硫键需要成环时，通常有两种情况：
 

自然随机成环:       序列中的Cys之间随机成环，与一对二硫键成环条件相似；
 

定点成环：       定点成环即序列中的Cys按照设计要求形成二硫键，反应过程相对复杂。在 固相合成多肽之前，需要提前设计几对二硫键形成的顺序和方法路线，选择不同的侧链 巯基保护基，利用其性质差异，分步氧化形成两对或多对二硫键。       通常采用的巯基保护 基有trt, Acm, Mmt, tBu, Bzl, Mob, Tmob等多种基团。

Definition
Adrenomedullin (AM) is a pluripotent peptide and a hypotensive substance extracted from human adrenal tumour. Due to its origin of discovery, i.e. the medulla of the adrenal gland, the peptide is named adrenomedullin.
Discovery
AM was initially isolated from phaechromcytoma cells in 1993 by Kitmura K and his associates1.

Classification
AM is a member of the calcitonin family of peptides. In teleost fish, AM forms an independent subfamily consisting of five members viz. (AM1–AM5). This teleost AM family comprises three groups, AM1/AM4, AM2/AM3, and AM5 2,3.

Structural Characteristics
The peptide consists of 52 amino acids with a 6-member ring structure linked by a disulfide bond between amino acid 16 and 21 and amidated-COOH terminal4. It has 27 % homology with the calcitonin gene-related peptide (CGRP).

Mechanism of action
AM peptides act through specific receptors in the plasma membrane to activate adenylate cyclase activity and modulate Ca2+ flux in the target cells. The intracellular free Ca2+ increases on the activation of phospholipase C and formation of inositol 1, 4, 5-trisphosphate in the endothelial cells. The intracellular increase of Ca2+ activates endothelial nitric oxide synthase which leads to vascular relaxation5.

Function
AM is the most potent endogenous vasodilatory peptide found in the body6. They increase the tolerance of cells to oxidative stress, hypoxic injury and angiogenesis. It plays an important role in neurotransmission and ovarian function and in kidney, it acts as a diuretic and natriuretic7. AM is considered to play an important endocrine role in various tissues in maintaining electrolyte and fluid homeostasis8. It is used in the diagnosis and treatment of preeclampsia, type II diabetic patients and to promote fetal growth. They also play an important role in the regulation of insulin secretion and blood glucose metabolism.

References

1.     Kitamura K, Kangawa K, Kawamoto M, Ichiki Y, Nakamura S, Matsuo H, Eto T (1993). Adrenomedullin: a novel hypotensive peptide isolated from human pheochromocytoma. Biochem Biophys Res Commun., 192 (2):553-560.

2.     Ogoshi M, Nobata S, and Takei Y (2008). Potent osmoregulatory actions of homologous adrenomedullins administered peripherally and centrally in eels. Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol, 295: 2075-2083.

3.     Ogoshi M, Inoue K, Naruse K, Takei Y (2006). Evolutionary history of the calcitonin gene-related peptide family in vertebrates revealed by comparative genomic analyses. Peptides, 27 (12):3154-3164.

4.     Cockcroft JR, Noon JP, Gardner-Medwin J, Bennett T (1997). Haemodynamic effects of adrenomedullin in human resistance and capacitance vessels. Br J Clin Pharmacol, 44(1):57-60.

5.     Shimekake Y, Nagata K, Ohta S, Kambayashi Y, Teraoka H, Kitamura K, Eto T, Kangawa K, Matsuo H (1995). Adrenomedullin stimulates two signal transduction pathways, cAMP accumulation and Ca2+ mobilization, in bovine aortic endothelial cells. J Biol Chem, 270: 4412-4417.

6.     Yanagawa B, Nagaya N (2007). Adrenomedullin: molecular mechanisms and its role in cardiac disease. Amino Acids, 32 (1):157-164.

7.     Vesely DL (2003). Natriuretic peptides and acute renal failure. Am J Physiol Renal Physiol, 285 (2):167-177.

8.     Ruzicska E, Toth M, Tulassay Z, Somogyi A (2001). Adrenomedullin and diabetes mellitus. Diabetes Metab Res Rev, 17 (5):321-329.