| 编号: | 200229 |
| 中文名称: | 七肽pGlu-HWSY-DLeu-LR |
| CAS号: | 112642-14-5 |
| 单字母: | Pyr-HWSYlLR-OH |
| 三字母: | Pyr 焦谷氨酸 -His组氨酸 -Trp色氨酸 -Ser丝氨酸 -Tyr酪氨酸 -DLeuD型亮氨酸 -Leu亮氨酸 -Arg精氨酸 -OHC端羧基 |
| 氨基酸个数: | 7 |
| 分子式: | C52H72N14O12 |
| 平均分子量: | 1085.21 |
| 精确分子量: | 1084.55 |
| 等电点(PI): | - |
| pH=7.0时的净电荷数: | 2.24 |
| 平均亲水性: | -1.0857142857143 |
| 疏水性值: | -0.39 |
| 消光系数: | 6990 |
| 来源: | 人工化学合成，仅限科学研究使用，不得用于人体。 |
| 储存条件: | 负80℃至负20℃ |
| 标签: | D型氨基酸肽 垂体和下丘脑激素 |
很多蛋白在细胞中非常容易被降解，或被标记，进而被选择性地破坏。但含有部分D型氨基酸的多肽则显示了很强的抵抗蛋白酶降解能力。
| DOI | 名称 | |
|---|---|---|
| 10.1210/en.2004-0560 | Stimulation of luteinizing hormone-releasing hormone (LHRH) gene expression in GT1-7 cells by its metabolite, LHRH-(1-5) | 下载 |
| 10.1111/j.1365-2826.2009.01854.x | A biological role for the gonadotrophin-releasing hormone (GnRH) metabolite, GnRH-(1-5) | 下载 |
| 10.3389/fendo.2013.00083 | The Novel Actions of the Metabolite GnRH-(1-5) are Mediated by a G Protein-Coupled Receptor | 下载 |
| 10.1016/0196-9781(83)90160-2 | Mechanism of degradation of LH-RH and neurotensin by synaptosomal peptidases | 下载 |
多肽Pyr-His-Trp-Ser-Tyr-DLeu-Leu-Arg-COOH的合成步骤：
1、合成CTC树脂：称取0.12g CTC Resin（如初始取代度约为0.69mmol/g）和0.1mmol Fmoc-Arg(Pbf)-OH于反应器中，加入适量DCM溶解氨基酸（需要注意，此时CTC树脂体积会增大好几倍，避免DCM溶液过少），再加入0.25mmol DIPEA（Mw：129.1,d：0.740g/ml），反应2-3小时后，可不抽滤溶液，直接加入1ml的HPLC级甲醇，封端半小时。依次用DMF洗涤2次，甲醇洗涤1次，DCM洗涤一次，甲醇洗涤一次，DCM洗涤一次，DMF洗涤2次（这里使用甲醇和DCM交替洗涤，是为了更好地去除其他溶质，有利于后续反应）。得到 Fmoc-Arg(Pbf)-CTC Resin。结构图如下：
2、脱Fmoc：加3倍树脂体积的20%Pip/DMF溶液，鼓氮气30分钟，然后2倍树脂体积的DMF 洗涤5次。得到 H2N-Arg(Pbf)-CTC Resin 。（此步骤脱除Fmoc基团，茚三酮检测为蓝色，Pip为哌啶）。结构图如下：
3、缩合：取0.25mmol Fmoc-Leu-OH 氨基酸，加入到上述树脂里，加适当DMF溶解氨基酸，再依次加入0.5mmol DIPEA，0.24mmol HBTU。反应30分钟后，取小样洗涤，茚三酮检测为无色。用2倍树脂体积的DMF 洗涤3次树脂。（洗涤树脂，去掉残留溶剂，为下一步反应做准备）。得到Fmoc-Leu-Arg(Pbf)-CTC Resin。氨基酸：DIPEA：HBTU：树脂=3：6：2.85：1（摩尔比）。结构图如下：
4、依次循环步骤二、步骤三，依次得到
H2N-Leu-Arg(Pbf)-CTC Resin
Fmoc-DLeu-Leu-Arg(Pbf)-CTC Resin
H2N-DLeu-Leu-Arg(Pbf)-CTC Resin
Fmoc-Tyr(tBu)-DLeu-Leu-Arg(Pbf)-CTC Resin
H2N-Tyr(tBu)-DLeu-Leu-Arg(Pbf)-CTC Resin
Fmoc-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-DLeu-Leu-Arg(Pbf)-CTC Resin
H2N-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-DLeu-Leu-Arg(Pbf)-CTC Resin
Fmoc-Trp(Boc)-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-DLeu-Leu-Arg(Pbf)-CTC Resin
H2N-Trp(Boc)-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-DLeu-Leu-Arg(Pbf)-CTC Resin
Fmoc-His(Trt)-Trp(Boc)-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-DLeu-Leu-Arg(Pbf)-CTC Resin
以上中间结构，均可在专肽生物多肽计算器-多肽结构计算器中，一键画出。
最后再经过步骤二得到 H2N-His(Trt)-Trp(Boc)-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-DLeu-Leu-Arg(Pbf)-CTC Resin，结构如下：
5、焦谷氨酸反应连接：在上述树脂中，加入适当DMF后，再加入0.25mmol 焦谷氨酸到树脂中，再加入0.5mmol DIPEA、0.24mmol HBTU，鼓氮气反应30分钟。用2倍树脂体积的DMF 洗涤3次树脂（洗涤树脂，去掉残留溶剂，为下一步反应做准备）。 得到Pyr-His(Trt)-Trp(Boc)-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-DLeu-Leu-Arg(Pbf)-CTCResin。 结构如下：
6、切割：6倍树脂体积的切割液（或每1g树脂加8ml左右的切割液），摇床摇晃 2小时，过滤掉树脂，用冰无水乙醚沉淀滤液，并用冰无水乙醚洗涤沉淀物3次，最后将沉淀物放真空干燥釜中，常温干燥24小试，得到粗品Pyr-His-Trp-Ser-Tyr-DLeu-Leu-Arg-COOH。结构图见产品结构图。
切割液选择：1）TFA：H2O=95%：5%
2）TFA：H2O：TIS=95%：2.5%：2.5%
3）三氟乙酸：茴香硫醚：1，2-乙二硫醇：苯酚：水=87.5%：5%：2.5%：2.5%：2.5%
（前两种适合没有容易氧化的氨基酸，例如Trp、Cys、Met。第三种适合几乎所有的序列。）
6、纯化冻干：使用液相色谱纯化，收集目标峰液体，进行冻干，获得蓬松的粉末状固体多肽。不过这时要取小样复测下纯度 是否目标纯度。
7、最后总结：
杭州专肽生物技术有限公司（ALLPEPTIDE https://www.allpeptide.com）主营定制多肽合成业务，提供各类长肽，短肽，环肽，提供各类修饰肽，如：荧光标记修饰（CY3、CY5、CY5.5、CY7、FAM、FITC、Rhodamine B、TAMRA等），功能基团修饰肽（叠氮、炔基、DBCO、DOTA、NOTA等），同位素标记肽（N15、C13），订书肽（Stapled Peptide）,脂肪酸修饰肽（Pal、Myr、Ste），磷酸化修饰肽（P-Ser、P-Thr、P-Tyr），环肽（酰胺键环肽、一对或者多对二硫键环），生物素标记肽，PEG修饰肽，甲基化修饰肽
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