发现这种 pTHrP (7-34) 酰胺类似物是 ROS 细胞中 pTH 刺激的 cAMP 生成的有效拮抗剂，并且显示不显示部分激动作用。
编号：200333
CAS号：129622-68-0
单字母：H2N-LLHNLwKSIQDLRRRFFLHHLIAEIHTA-NH2
| 编号: | 200333 |
| 中文名称: | 甲状旁腺激素 (Asn¹⁰,Leu¹¹,D-Trp¹²)-pTH-Related Protein ( |
| 英文名: | (Asn¹⁰,Leu¹¹,D-Trp¹²)-Parathyroid Hormone-Related |
| CAS号: | 129622-68-0 |
| 单字母: | H2N-LLHNLwKSIQDLRRRFFLHHLIAEIHTA-NH2 |
| 三字母: | H2N N端氨基 -Leu亮氨酸 -Leu亮氨酸 -His组氨酸 -Asn天冬酰胺 -Leu亮氨酸 -DTrpD型色氨酸 -Lys赖氨酸 -Ser丝氨酸 -Ile异亮氨酸 -Gln谷氨酰胺 -Asp天冬氨酸 -Leu亮氨酸 -Arg精氨酸 -Arg精氨酸 -Arg精氨酸 -Phe苯丙氨酸 -Phe苯丙氨酸 -Leu亮氨酸 -His组氨酸 -His组氨酸 -Leu亮氨酸 -Ile异亮氨酸 -Ala丙氨酸 -Glu谷氨酸 -Ile异亮氨酸 -His组氨酸 -Thr苏氨酸 -Ala丙氨酸 -NH2C端酰胺化 |
| 氨基酸个数: | 28 |
| 分子式: | C162H254N50O36 |
| 平均分子量: | 3478.06 |
| 精确分子量: | 3475.96 |
| 等电点(PI): | 12.23 |
| pH=7.0时的净电荷数: | 3.92 |
| 平均亲水性: | -0.33214285714286 |
| 疏水性值: | -0.04 |
| 消光系数: | 5500 |
| 来源: | 人工化学合成，仅限科学研究使用，不得用于人体。 |
| 储存条件: | 负80℃至负20℃ |
| 标签: | D型氨基酸肽 |
This pTHrP (7-34) amide analog was found to be an effective antagonist of pTH-stimulated cAMP production in ROS cells and was shown not to display partial agonism.
很多蛋白在细胞中非常容易被降解，或被标记，进而被选择性地破坏。但含有部分D型氨基酸的多肽则显示了很强的抵抗蛋白酶降解能力。
| DOI | 名称 | |
|---|---|---|
| 10.1681/ASN.2005070690 | Role of parathyroid hormone-related protein in tubulointerstitial apoptosis and fibrosis after folic acid-induced nephrotoxicity | 下载 |
| 10.1210/endo-127-1-491 | Removal of partial agonism from parathyroid hormone (PTH)-related protein-(7-34)NH2 by substitution of PTH amino acids at positions 10 and 11 | 下载 |
| 10.1038/ncb2977 | Colon cancer cells colonize the lung from established liver metastases through p38 MAPK signalling and PTHLH | 下载 |
| 10.1016/0006-291x(89)92826-x | In vitro and in vivo antagonists against parathyroid hormone-related protein | 下载 |
| 10.1210/en.2012-1802 | Parathyroid hormone-related protein is a mitogenic and a survival factor of mesangial cells from male mice: role of intracrine and paracrine pathways | 下载 |
| 10.1089/scd.2014.0101 | Intermittent PTHrP(1-34) exposure augments chondrogenesis and reduces hypertrophy of mesenchymal stromal cells | 下载 |
多肽H2N-Leu-Leu-His-Asn-Leu-DTrp-Lys-Ser-Ile-Gln-Asp-Leu-Arg-Arg-Arg-Phe-Phe-Leu-His-His-Leu-Ile-Ala-Glu-Ile-His-Thr-Ala-NH2的合成步骤：
1、合成MBHA树脂：取若干克的MBHA树脂（如初始取代度为0.5mmol/g）和1倍树脂摩尔量的Fmoc-Linker-OH加入到反应器中，加入DMF，搅拌使氨基酸完全溶解。再加入树脂2倍量的DIEPA，搅拌混合均匀。再加入树脂0.95倍量的HBTU，搅拌混合均匀。反应3-4小时后，用DMF洗涤3次。用2倍树脂体积的10%乙酸酐/DMF 进行封端30分钟。然后再用DMF洗涤3次，甲醇洗涤2次，DCM洗涤2次，再用甲醇洗涤2次。真空干燥12小时以上，得到干燥的树脂{Fmoc-Linker-MHBA Resin}，测定取代度。这里测得取代度为 0.3mmol/g。结构如下图：
2、脱Fmoc：取1.19g的上述树脂，用DCM或DMF溶胀20分钟。用DMF洗涤2遍。加3倍树脂体积的20%Pip/DMF溶液，鼓氮气30分钟，然后2倍树脂体积的DMF 洗涤5次。得到 H2N-Linker-MBHA Resin 。（此步骤脱除Fmoc基团，茚三酮检测为蓝色，Pip为哌啶）。结构图如下：
3、缩合：取1.07mmol Fmoc-Ala-OH 氨基酸，加入到上述树脂里，加适当DMF溶解氨基酸，再依次加入2.14mmol DIPEA，1.02mmol HBTU。反应30分钟后，取小样洗涤，茚三酮检测为无色。用2倍树脂体积的DMF 洗涤3次树脂。（洗涤树脂，去掉残留溶剂，为下一步反应做准备）。得到Fmoc-Ala-Linker-MBHA Resin。氨基酸：DIPEA：HBTU：树脂=3：6：2.85：1（摩尔比）。结构图如下：
4、依次循环步骤二、步骤三，依次得到
H2N-Ala-Linker-MBHA Resin
Fmoc-Thr(tBu)-Ala-Linker-MBHA Resin
H2N-Thr(tBu)-Ala-Linker-MBHA Resin
Fmoc-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Linker-MBHA Resin
H2N-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Linker-MBHA Resin
Fmoc-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Linker-MBHA Resin
H2N-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Linker-MBHA Resin
Fmoc-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Linker-MBHA Resin
H2N-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Linker-MBHA Resin
Fmoc-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Linker-MBHA Resin
H2N-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Linker-MBHA Resin
Fmoc-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Linker-MBHA Resin
H2N-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Linker-MBHA Resin
Fmoc-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Linker-MBHA Resin
H2N-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Linker-MBHA Resin
Fmoc-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Linker-MBHA Resin
H2N-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Linker-MBHA Resin
Fmoc-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Linker-MBHA Resin
H2N-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Linker-MBHA Resin
Fmoc-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Linker-MBHA Resin
H2N-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Linker-MBHA Resin
Fmoc-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Linker-MBHA Resin
H2N-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Linker-MBHA Resin
Fmoc-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Linker-MBHA Resin
H2N-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Linker-MBHA Resin
Fmoc-Arg(Pbf)-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Linker-MBHA Resin
H2N-Arg(Pbf)-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Linker-MBHA Resin
Fmoc-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Linker-MBHA Resin
H2N-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Linker-MBHA Resin
Fmoc-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Linker-MBHA Resin
H2N-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Linker-MBHA Resin
Fmoc-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Linker-MBHA Resin
H2N-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Linker-MBHA Resin
Fmoc-Asp(OtBu)-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Linker-MBHA Resin
H2N-Asp(OtBu)-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Linker-MBHA Resin
Fmoc-Gln(Trt)-Asp(OtBu)-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Linker-MBHA Resin
H2N-Gln(Trt)-Asp(OtBu)-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Linker-MBHA Resin
Fmoc-Ile-Gln(Trt)-Asp(OtBu)-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Linker-MBHA Resin
H2N-Ile-Gln(Trt)-Asp(OtBu)-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Linker-MBHA Resin
Fmoc-Ser(tBu)-Ile-Gln(Trt)-Asp(OtBu)-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Linker-MBHA Resin
H2N-Ser(tBu)-Ile-Gln(Trt)-Asp(OtBu)-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Linker-MBHA Resin
Fmoc-Lys(Boc)-Ser(tBu)-Ile-Gln(Trt)-Asp(OtBu)-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Linker-MBHA Resin
H2N-Lys(Boc)-Ser(tBu)-Ile-Gln(Trt)-Asp(OtBu)-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Linker-MBHA Resin
Fmoc-DTrp(Boc)-Lys(Boc)-Ser(tBu)-Ile-Gln(Trt)-Asp(OtBu)-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Linker-MBHA Resin
H2N-DTrp(Boc)-Lys(Boc)-Ser(tBu)-Ile-Gln(Trt)-Asp(OtBu)-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Linker-MBHA Resin
Fmoc-Leu-DTrp(Boc)-Lys(Boc)-Ser(tBu)-Ile-Gln(Trt)-Asp(OtBu)-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Linker-MBHA Resin
H2N-Leu-DTrp(Boc)-Lys(Boc)-Ser(tBu)-Ile-Gln(Trt)-Asp(OtBu)-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Linker-MBHA Resin
Fmoc-Asn(Trt)-Leu-DTrp(Boc)-Lys(Boc)-Ser(tBu)-Ile-Gln(Trt)-Asp(OtBu)-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Linker-MBHA Resin
H2N-Asn(Trt)-Leu-DTrp(Boc)-Lys(Boc)-Ser(tBu)-Ile-Gln(Trt)-Asp(OtBu)-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Linker-MBHA Resin
Fmoc-His(Trt)-Asn(Trt)-Leu-DTrp(Boc)-Lys(Boc)-Ser(tBu)-Ile-Gln(Trt)-Asp(OtBu)-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Linker-MBHA Resin
H2N-His(Trt)-Asn(Trt)-Leu-DTrp(Boc)-Lys(Boc)-Ser(tBu)-Ile-Gln(Trt)-Asp(OtBu)-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Linker-MBHA Resin
Fmoc-Leu-His(Trt)-Asn(Trt)-Leu-DTrp(Boc)-Lys(Boc)-Ser(tBu)-Ile-Gln(Trt)-Asp(OtBu)-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Linker-MBHA Resin
H2N-Leu-His(Trt)-Asn(Trt)-Leu-DTrp(Boc)-Lys(Boc)-Ser(tBu)-Ile-Gln(Trt)-Asp(OtBu)-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Linker-MBHA Resin
Fmoc-Leu-Leu-His(Trt)-Asn(Trt)-Leu-DTrp(Boc)-Lys(Boc)-Ser(tBu)-Ile-Gln(Trt)-Asp(OtBu)-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Linker-MBHA Resin
以上中间结构，均可在专肽生物多肽计算器-多肽结构计算器中，一键画出。
最后再经过步骤二得到 H2N-Leu-Leu-His(Trt)-Asn(Trt)-Leu-DTrp(Boc)-Lys(Boc)-Ser(tBu)-Ile-Gln(Trt)-Asp(OtBu)-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-Linker-MBHA Resin，结构如下：
5、切割：6倍树脂体积的切割液（或每1g树脂加8ml左右的切割液），摇床摇晃 2小时，过滤掉树脂，用冰无水乙醚沉淀滤液，并用冰无水乙醚洗涤沉淀物3次，最后将沉淀物放真空干燥釜中，常温干燥24小试，得到粗品H2N-Leu-Leu-His-Asn-Leu-DTrp-Lys-Ser-Ile-Gln-Asp-Leu-Arg-Arg-Arg-Phe-Phe-Leu-His-His-Leu-Ile-Ala-Glu-Ile-His-Thr-Ala-NH2。结构图见产品结构图。
切割液选择：1）TFA：H2O=95%：5%
2）TFA：H2O：TIS=95%：2.5%：2.5%
3）三氟乙酸：茴香硫醚：1，2-乙二硫醇：苯酚：水=87.5%：5%：2.5%：2.5%：2.5%
（前两种适合没有容易氧化的氨基酸，例如Trp、Cys、Met。第三种适合几乎所有的序列。）
6、纯化冻干：使用液相色谱纯化，收集目标峰液体，进行冻干，获得蓬松的粉末状固体多肽。不过这时要取小样复测下纯度 是否目标纯度。
7、最后总结：
杭州专肽生物技术有限公司（ALLPEPTIDE https://www.allpeptide.com）主营定制多肽合成业务，提供各类长肽，短肽，环肽，提供各类修饰肽，如：荧光标记修饰（CY3、CY5、CY5.5、CY7、FAM、FITC、Rhodamine B、TAMRA等），功能基团修饰肽（叠氮、炔基、DBCO、DOTA、NOTA等），同位素标记肽（N15、C13），订书肽（Stapled Peptide）,脂肪酸修饰肽（Pal、Myr、Ste），磷酸化修饰肽（P-Ser、P-Thr、P-Tyr），环肽（酰胺键环肽、一对或者多对二硫键环），生物素标记肽，PEG修饰肽，甲基化修饰肽等。
以上所有内容，为专肽生物原创内容，请勿发布到其他网站上。
