我们在自然界中可以看到各种各样的蛋白质和活性多肽,它们具有自己特有的生物 功能。这些种类繁多的蛋白质和多肽,从化学结构上来看,又都是由称之为氨基酸的单体 组成的。就今天所知道的结果来说,组成蛋白质和动物组织内的活性多肽的氨基酸种类 主要有二十多种■并且都是L-(或S-)型的a•氨基酸。在微生物来源的活性多肽组成中, 包括抗菌素多肽和细菌细胞壁多肽等,则还存在有D-(或L-)型的氨基酸和一些其它 的特别氨基酸。各个氨基酸之闾通过一个氨基酸的鼓基同另一个氨基酸的氨基以酰胺键 (也叫做肽键)结合连接成肽链,由二个氨基酸连成的叫二肽,三个氨基酸连成的叫三肽, 并依次类推下去。
PEG酸是一类PEG化合物,其一端具有一个羧酸基,另一端具有一个羟基,叠氮基,氨基,马来酰亚胺或三键。 这些试剂具有确定的分子量和间隔长度,并用于修饰蛋白质或含有胺基的表面,例如量子点,自组装单分子层和磁性颗粒。 用PEG间隔基对固体表面进行功能化可显着降低非特异性蛋白质结合。
一、什么是荧光标记? 荧光标记所依赖的化合物称为荧光物质。荧光物质是指具有共轭双键体系化学结构的化合物,受到紫外光或蓝紫光照射时,可激发成为激发态,当从激发态恢复基态时,发出荧光。荧光标记技术指利用荧光物质共价结合或物理吸附在所要研究分子的某个基团上,利用它的荧光特性来提供被研究对象的信息。荧光标记的无放射物污染,操作简便等优点,使得荧光标记物在许多研究领域的应用日趋广泛。 二、荧光标记的作用 荧光标记物质在蛋白的功能研究、药物筛选等领域也有着广泛的应用。人们利用利用荧光标记的多肽来检测目标蛋白的活性,并将其发展的高通量活性筛选方法应用于疾病治疗靶点蛋白的药物筛选和药物开发(例如,各种激酶、磷酸酶、肽酶等)。因此,多肽的荧光修饰,同样是多肽合成领域的重要内容。
多肽是由多个氨基酸通过肽键连接而形成的一类化合物,普遍存在于生物体内,迄今在生物体内发现的多肽已达数万种。多肽在调节机体各系统、器官、组织和细胞的功能活动以及在生命活动中发挥重要作用,并且常被应用于功能分析、抗体研究、药物研发等领域。随着生物技术与多肽合成技术的日臻成熟,越来越多的多肽药物被开发并应用于临床。 多肽修饰种类繁多,可以简单划分为后修饰和过程修饰(利用衍生化的氨基酸修饰),从修饰位点不同则可分为N端修饰、C端修饰、侧链修饰、氨基酸修饰、骨架修饰等(图1)。作为一种改变肽链主链结构或侧链基团的重要手段,多肽修饰可有效改变肽类化合物的理化性质、增加水溶性、延长体内作用时间、改变其生物分布状况、消除免疫原性、降低毒副作用等。本文主要介绍几种最主要的多肽修饰策略及特点。