多肽标签3x Hemagglutinin (HA) Tag、3XHA tag_H2N-Met-Glu-Tyr-Pro-Tyr-Asp-Val-Pro-Asp-Tyr-Ala-Ala-Glu-Tyr-Pro-Tyr-Asp-Val-Pro-Asp-Tyr-Ala-Ala-Glu-Tyr-Pro-Tyr-Asp-Val-Pro-Asp-Tyr-Ala-Ala-Lys-Leu-Glu-OH_H2N-MEYPYDVPDYAAEYPYDVPDYAAEYPYDVPDYAAKLE-OH_多肽标签(Tag)

多肽产品

多肽标签3x Hemagglutinin (HA) Tag、3XHA tag
3X HA Tag 是一种有生物活性的肽。该标签肽可用于检测蛋白质和肽。

编号：153859

CAS号：

单字母：H2N-MEYPYDVPDYAAEYPYDVPDYAAEYPYDVPDYAAKLE-OH

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编号:	153859
中文名称:	多肽标签3x Hemagglutinin (HA) Tag、3XHA tag
英文名:	3x Hemagglutinin (HA) Tag
单字母:	H2N-MEYPYDVPDYAAEYPYDVPDYAAEYPYDVPDYAAKLE-OH
三字母:	H2N N端氨基：N-terminal amino group。在肽或多肽链中含有游离a-氨基的氨基酸一端。在表示氨基酸序列时，通常将N端放在肽链的左边。 -Met L-甲硫氨酸：methionine又称“蛋氨酸”。系统命名为(2S)-氨基-4-甲硫基丁酸。是编码氨基酸。是哺乳动物的必需氨基酸。符号：M，Met。 -Glu L-谷氨酸：glutamic acid。系统命名为(2S)-氨基-戊二酸。是编码氨基酸。符号：E，Glu。D-谷氨酸存在于多种细菌的细胞壁和某些细菌杆菌肽中。 -Tyr L-酪氨酸：tyrosine。系统命名为(2S)-氨基-3-(4-羟基苯基)丙酸。是编码氨基酸。符号：Y，Tyr。 -Pro L-脯氨酸：proline。系统命名为吡咯烷-(2S)-羧酸。为亚氨基酸。是编码氨基酸。在肽链中有特殊作用，如易形成顺式的肽键等。符号：P，Pro。 -Tyr L-酪氨酸：tyrosine。系统命名为(2S)-氨基-3-(4-羟基苯基)丙酸。是编码氨基酸。符号：Y，Tyr。 -Asp L-天冬氨酸：aspartic acid。系统命名为(2S)-氨基-丁二酸。是编码氨基酸，又是神经递质。符号：D，Asp。D-天冬氨酸存在于多种细菌的细胞壁和短杆菌肽A中。 -Val L-缬氨酸：valine。系统命名为(2S)-氨基-3-甲基丁酸。是编码氨基酸。是哺乳动物的必需氨基酸。符号：V，Val。在某些放线菌素如缬霉素中存在 D-缬氨酸。 -Pro L-脯氨酸：proline。系统命名为吡咯烷-(2S)-羧酸。为亚氨基酸。是编码氨基酸。在肽链中有特殊作用，如易形成顺式的肽键等。符号：P，Pro。 -Asp L-天冬氨酸：aspartic acid。系统命名为(2S)-氨基-丁二酸。是编码氨基酸，又是神经递质。符号：D，Asp。D-天冬氨酸存在于多种细菌的细胞壁和短杆菌肽A中。 -Tyr L-酪氨酸：tyrosine。系统命名为(2S)-氨基-3-(4-羟基苯基)丙酸。是编码氨基酸。符号：Y，Tyr。 -Ala 丙氨酸：alanine。L-丙氨酸的系统命名为(2S)-氨基丙酸，是编码氨基酸，也叫L-α-丙氨酸。符号：A，Ala。D-丙氨酸存在于多种细菌细胞壁的糖肽中。β-丙氨酸是维生素泛酸和辅酶A的组分。 -Ala 丙氨酸：alanine。L-丙氨酸的系统命名为(2S)-氨基丙酸，是编码氨基酸，也叫L-α-丙氨酸。符号：A，Ala。D-丙氨酸存在于多种细菌细胞壁的糖肽中。β-丙氨酸是维生素泛酸和辅酶A的组分。 -Glu L-谷氨酸：glutamic acid。系统命名为(2S)-氨基-戊二酸。是编码氨基酸。符号：E，Glu。D-谷氨酸存在于多种细菌的细胞壁和某些细菌杆菌肽中。 -Tyr L-酪氨酸：tyrosine。系统命名为(2S)-氨基-3-(4-羟基苯基)丙酸。是编码氨基酸。符号：Y，Tyr。 -Pro L-脯氨酸：proline。系统命名为吡咯烷-(2S)-羧酸。为亚氨基酸。是编码氨基酸。在肽链中有特殊作用，如易形成顺式的肽键等。符号：P，Pro。 -Tyr L-酪氨酸：tyrosine。系统命名为(2S)-氨基-3-(4-羟基苯基)丙酸。是编码氨基酸。符号：Y，Tyr。 -Asp L-天冬氨酸：aspartic acid。系统命名为(2S)-氨基-丁二酸。是编码氨基酸，又是神经递质。符号：D，Asp。D-天冬氨酸存在于多种细菌的细胞壁和短杆菌肽A中。 -Val L-缬氨酸：valine。系统命名为(2S)-氨基-3-甲基丁酸。是编码氨基酸。是哺乳动物的必需氨基酸。符号：V，Val。在某些放线菌素如缬霉素中存在 D-缬氨酸。 -Pro L-脯氨酸：proline。系统命名为吡咯烷-(2S)-羧酸。为亚氨基酸。是编码氨基酸。在肽链中有特殊作用，如易形成顺式的肽键等。符号：P，Pro。 -Asp L-天冬氨酸：aspartic acid。系统命名为(2S)-氨基-丁二酸。是编码氨基酸，又是神经递质。符号：D，Asp。D-天冬氨酸存在于多种细菌的细胞壁和短杆菌肽A中。 -Tyr L-酪氨酸：tyrosine。系统命名为(2S)-氨基-3-(4-羟基苯基)丙酸。是编码氨基酸。符号：Y，Tyr。 -Ala 丙氨酸：alanine。L-丙氨酸的系统命名为(2S)-氨基丙酸，是编码氨基酸，也叫L-α-丙氨酸。符号：A，Ala。D-丙氨酸存在于多种细菌细胞壁的糖肽中。β-丙氨酸是维生素泛酸和辅酶A的组分。 -Ala 丙氨酸：alanine。L-丙氨酸的系统命名为(2S)-氨基丙酸，是编码氨基酸，也叫L-α-丙氨酸。符号：A，Ala。D-丙氨酸存在于多种细菌细胞壁的糖肽中。β-丙氨酸是维生素泛酸和辅酶A的组分。 -Glu L-谷氨酸：glutamic acid。系统命名为(2S)-氨基-戊二酸。是编码氨基酸。符号：E，Glu。D-谷氨酸存在于多种细菌的细胞壁和某些细菌杆菌肽中。 -Tyr L-酪氨酸：tyrosine。系统命名为(2S)-氨基-3-(4-羟基苯基)丙酸。是编码氨基酸。符号：Y，Tyr。 -Pro L-脯氨酸：proline。系统命名为吡咯烷-(2S)-羧酸。为亚氨基酸。是编码氨基酸。在肽链中有特殊作用，如易形成顺式的肽键等。符号：P，Pro。 -Tyr L-酪氨酸：tyrosine。系统命名为(2S)-氨基-3-(4-羟基苯基)丙酸。是编码氨基酸。符号：Y，Tyr。 -Asp L-天冬氨酸：aspartic acid。系统命名为(2S)-氨基-丁二酸。是编码氨基酸，又是神经递质。符号：D，Asp。D-天冬氨酸存在于多种细菌的细胞壁和短杆菌肽A中。 -Val L-缬氨酸：valine。系统命名为(2S)-氨基-3-甲基丁酸。是编码氨基酸。是哺乳动物的必需氨基酸。符号：V，Val。在某些放线菌素如缬霉素中存在 D-缬氨酸。 -Pro L-脯氨酸：proline。系统命名为吡咯烷-(2S)-羧酸。为亚氨基酸。是编码氨基酸。在肽链中有特殊作用，如易形成顺式的肽键等。符号：P，Pro。 -Asp L-天冬氨酸：aspartic acid。系统命名为(2S)-氨基-丁二酸。是编码氨基酸，又是神经递质。符号：D，Asp。D-天冬氨酸存在于多种细菌的细胞壁和短杆菌肽A中。 -Tyr L-酪氨酸：tyrosine。系统命名为(2S)-氨基-3-(4-羟基苯基)丙酸。是编码氨基酸。符号：Y，Tyr。 -Ala 丙氨酸：alanine。L-丙氨酸的系统命名为(2S)-氨基丙酸，是编码氨基酸，也叫L-α-丙氨酸。符号：A，Ala。D-丙氨酸存在于多种细菌细胞壁的糖肽中。β-丙氨酸是维生素泛酸和辅酶A的组分。 -Ala 丙氨酸：alanine。L-丙氨酸的系统命名为(2S)-氨基丙酸，是编码氨基酸，也叫L-α-丙氨酸。符号：A，Ala。D-丙氨酸存在于多种细菌细胞壁的糖肽中。β-丙氨酸是维生素泛酸和辅酶A的组分。 -Lys L-赖氨酸：lysine。系统命名为(2S)-6-二氨基已酸。是编码氨基酸中的碱性氨基酸，哺乳动物的必需氨基酸。在蛋白质中的赖氨酸可以被修饰为多种形式的衍生物。符号：K，Lys。 -Leu L-亮氨酸：leucine。系统命名为(2S)-氨基-4-甲基戊酸。是编码氨基酸。是哺乳动物的必需氨基酸。符号：L，Leu。 -Glu L-谷氨酸：glutamic acid。系统命名为(2S)-氨基-戊二酸。是编码氨基酸。符号：E，Glu。D-谷氨酸存在于多种细菌的细胞壁和某些细菌杆菌肽中。 -OH C端羧基：C-terminal carboxyl group。在肽或多肽链中含有游离羧基的氨基酸一端。在表示氨基酸序列时，通常将C端放在肽链的右边。
氨基酸个数:	37
分子式:	C₂₀₅H₂₇₂N₃₈O₆₇S₁
平均分子量:	4372.63
精确分子量:	4369.88
等电点(PI):	8.77
pH=7.0时的净电荷数:	0.98
平均亲水性:	-0.26451612903226
疏水性值:	-0.74
外观与性状:	白色粉末状固体
消光系数:	13410
来源:	人工化学合成，仅限科学研究使用，不得用于人体。
纯度:	95%、98%
盐体系:	可选TFA、HAc、HCl或其它
储存条件:	负80℃至负20℃
标签:	多肽标签(Tag)

溶解度:

DMSO : 100 mg/mL (22.87 mM; Need ultrasonic; Hygroscopic DMSO has a significant impact on the solubility of product, please use newly opened DMSO)

实验参考方法:

3xHA标签蛋白纯化方案 A：细胞收集和裂解 1. 收集表达Sld7-3Flag-HA的YTT4细胞（7×10⁷cells/ml, 2.5L）。 2. 用蒸馏水清洗细胞一次。 3. 使用砂浆研磨机在液氮下破坏细胞。 4. 将细胞裂解液悬浮在5ml裂解缓冲液A（50mM HEPES-KOH（pH 7.5），300mM氯化钾，0.5%吐温20, 0.05% NP40, 10%甘油，1×Complete, 1%蛋白酶抑制剂混合物，50mM氟化钠，2mM β-甘油磷酸盐，0.4mM Na3VO4, 0.5mM Na4P2O7,1mM PMSF)中。 5. 在4°C下，12,000rpm离心15分钟，澄清裂解物。 B：蛋白提取和吸附 6. 将蛋白提取物吸附到1ml Sepharose 4B中，在4°C下吸附30分钟。 7. 将混合物与1ml anti-Flag M2亲和凝胶混合后与含有5mg/ml BSA的裂解缓冲液A预孵育，在4℃下孵育2.5小时。 C：用Flag Peptide洗涤和洗脱 8. 用含有5mg/ml BSA的ml裂解缓冲液A洗涤三次。 9. 用500μl的Flag洗脱缓冲液（裂解缓冲液A含有150mg/ml的3× Flag肽）在4℃下孵育1小时，洗脱结合蛋白2次。 D: Anti-HA Matrix进一步纯化 10. 洗脱液与120μl Anti-HA Matrix 混合后用anti-Flag M2亲和凝胶预处理，4℃孵育2.5小时。 11. 用1ml含5mg/ml BSA的缓冲液A洗涤3次，1ml含0.1mg/ml BSA的缓冲液A洗涤1次，1ml缓冲液A洗涤1次。 12. 用100μl HA洗脱缓冲液（裂解缓冲液A含1.5mg/ml 3× HA肽）在37℃下孵育30分钟，洗脱结合蛋白两次。 E：蛋白沉淀和分析 13. 加入三氯乙酸沉淀蛋白，然后离心。 14. 沉淀在50μl的1× SDS上样缓冲液中煮沸3分钟。 15. 用SDS -聚丙烯酰胺凝胶分离蛋白质，用SilverQuest染色。 16. 切胶获取蛋白，用胰蛋白酶消化，并用质谱法分析。本方案仅供参考，请根据您的具体需要进行修改。 References: [1] Tanaka, T., Umemori, T., Endo, S., Muramatsu, S., Kanemaki, M., Kamimura, Y., Obuse, C., & Araki, H. (2011). Sld7, an Sld3-associated protein required for efficient chromosomal DNA replication in budding yeast. The EMBO journal, 30(10), 2019–2030.

这种标签肽可用于检测蛋白质和肽，并有助于对目标蛋白质进行功能分析。

This tag peptide may be used to detect proteins and peptides, and to facilitate functional analysis of proteins of interest.

3X HA Tag 是一种有生物活性的肽。该标签肽可用于检测蛋白质和肽。

3X HA Tag是一种生物活性肽，由9个氨基酸残基（YPYDVPDYA）重复3次构成。

3X HA Tag是一种生物活性肽，由9个氨基酸残基（YPYDVPDYA）重复3次构成[1]。HA Tag来源于人类流感病毒的血凝素（HA）表面糖蛋白，具有高度的特异性和亲水性，能够增加融合蛋白表面抗原抗体反应的可能性[2]。3X HA Tag由于重复次数更多，抗原性更强，与抗HA抗体的结合亲和力更高，因此在检测时灵敏度更高，尤其适用于低表达蛋白的检测[3]。它广泛应用于蛋白广泛应用于蛋白亲和纯化实验中以洗脱HA标记的蛋白[4][5]。

3X HA Tag is a bioactive peptide composed of the 9-amino-acid sequence YPYDVPDYA repeated 3 times[1]. HA Tag is derived from the hemagglutinin (HA) surface glycoprotein of human influenza virus, featuring high specificity and hydrophilicity. It enhances the possibility of antigen - antibody reactions on the surface of fusion proteins[2]. With more repeats, 3X HA Tag has stronger antigenicity and higher binding affinity for anti - HA antibodies, ensuring higher detection sensitivity, especially for low - abundance proteins[3]. It's widely used in protein affinity purification experients to elute HA-tagged proteins[4][5].

References:
[1] Schneider, B. L., Seufert, W., Steiner, B., Yang, Q. H., & Futcher, A. B. (1995). Use of polymerase chain reaction epitope tagging for protein tagging in Saccharomyces cerevisiae. Yeast (Chichester, England), 11(13), 1265–1274.
[2] Zhao, X., Li, G., & Liang, S. (2013). Several affinity tags commonly used in chromatographic purification. Journal of analytical methods in chemistry, 2013, 581093.
[3] Ensinck, M., De Keersmaecker, L., Heylen, L., Ramalho, A. S., Gijsbers, R., Farré, R., De Boeck, K., Christ, F., Debyser, Z., & Carlon, M. S. (2020). Phenotyping of Rare CFTR Mutations Reveals Distinct Trafficking and Functional Defects. Cells, 9(3), 754.
[4] Lim, J., Iftner, T., & Simon, C. (2021). Native Isolation of 3×HA-Tagged Protein Complexes to Characterize Protein-Protein Interactions. Current protocols, 1(2), e29.
[5] Tanaka, T., Umemori, T., Endo, S., Muramatsu, S., Kanemaki, M., Kamimura, Y., Obuse, C., & Araki, H. (2011). Sld7, an Sld3-associated protein required for efficient chromosomal DNA replication in budding yeast. The EMBO journal, 30(10), 2019–2030.

专肽生物可以提供常见抗体制备、免疫学研究等生物科研需求的各类标签多肽（Tag peptide）以及蛋白底物产品，可用荧光标记(FITC、5-Fam)等。除常见抗体中抗原决定部位的标签多肽（tag: His | c-Myc | HA | FLAG | V5 | X-press | VSV tag | T7 tag | Snoop tag | E-tag | Sof tag 1 | Spy tag |等等），我们还提供各类定制标签肽的合成，并可提供荧光标记(FITC、5-Fam)等。同时，免费提供的MS和HPLC分析报告。
- 标签多肽His-tag、His6
- 编号：184961
- CAS号：64134-30-1
- 三字母：H2N-His-His-His-His-His-His-COOH
- 描述：Hexa-His是由6个His残基组成的肽，用作重组蛋白的金属结合位点。
- 标签多肽 polyglutamate tag
- 编号：156378
- CAS号：57738-23-5
- 三字母：H2N-Glu-Glu-Glu-Glu-Glu-Glu-COOH
- 标签多肽TC tag
- 编号：168488
- CAS号：
- 三字母：H2N-Cys-Cys-Pro-Gly-Cys-Cys-COOH
- 标签多肽FLAG Peptide
- 编号：133742
- CAS号：98849-88-8
- 三字母：H2N-Asp-Tyr-Lys-Asp-Asp-Asp-Asp-Lys-COOH
- 描述：一种八个氨基酸组成的多肽，具有肠激酶切割位点。FLAG peptide用于抗体介导的重组蛋白的识别和纯化。
- 标签多肽X-press
- 编号：188560
- CAS号：
- 三字母：H2N-Asp-Leu-Tyr-Asp-Asp-Asp-Asp-Lys-COOH
- 描述：X-press标签肽是用于蛋白质纯化的标签肽。 X-press Tag也是N末端前导肽
- 表位标签多肽Rhodopsin Epitope Tag
- 编号：200544
- CAS号：
- 三字母：H2N-Thr-Glu-Thr-Ser-Gln-Val-Ala-Pro-Ala-COOH
- 描述：位于牛视紫红质的C端区域内的9个氨基酸的肽。Rhodopsin Epitope Tag被广泛用作表位标签，并可被许多抗视紫红质抗体识别。
- 标签多肽VSV tag
- 编号：191225
- CAS号：
- 三字母：H2N-Tyr-Thr-Asp-Ile-Glu-Met-Asn-Arg-Leu-Gly-Lys-COOH
- 描述：VSV-G肽是一种源自水泡性口腔炎病毒糖蛋白的11个氨基酸的肽。
- 标签多肽T7 tag
- 编号：173612
- CAS号：245445-88-9
- 三字母：H2N-Met-Ala-Ser-Met-Thr-Gly-Gly-Gln-Gln-Met-Gly-COOH
- 描述：T7标签肽是一种源自T7主要衣壳蛋白的11个氨基酸的肽，在许多基于非常高效的T7 RNA聚合酶表达系统的表达载体中充当标签。
- 标签多肽Snoop tag
- 编号：198398
- 三字母：H2N-Lys-Leu-Gly-Asp-Ile-Glu-Phe-Ile-Lys-Val-Asn-Lys-COOH
- 标签多肽E-tag
- 编号：148092
- CAS号：120944-72-1
- 三字母：H2N-Gly-Ala-Pro-Val-Pro-Tyr-Pro-Asp-Pro-Leu-Glu-Pro-Arg-COOH
- 描述：KRSR 选择性增强硫酸乙酰肝素介导的成骨细胞粘附机制。阐明此类肽序列对于骨细胞/组织工程领域以及主动牙科/骨科生物材料的设计具有重要意义。(专肽生物)注意：该肽的使用由位于美国纽约州特洛伊的伦斯勒理工学院 (RPI) 拥有的美国专利第 6,262,017 B1 号涵盖。RPI 授权每年购买 5 克或更少的购买者仅将这种肽用于研究目的。其他购买者必须获得 RPI 的书面许可。
- 标签多肽Sof tag 1
- 编号：180500
- 三字母：H2N-Ser-Leu-Ala-Glu-Leu-Leu-Asn-Ala-Gly-Leu-Gly-Gly-Ser-COOH
- 标签多肽Spy tag
- 编号：194291
- 三字母：H2N-Ala-His-Ile-Val-Met-Val-Asp-Ala-Tyr-Lys-Pro-Thr-Lys-COOH
- 标签多肽V5 tag、V5表位标签肽
- 编号：135352
- 三字母：H2N-Gly-Lys-Pro-Ile-Pro-Asn-Pro-Leu-Leu-Gly-Leu-Asp-Ser-Thr-COOH
- 描述：V5表位标签肽三氟乙酸盐是一种衍生自猿猴病毒5副粘病毒P和V蛋白上存在的小表位的标签肽。
- 标签多肽S-tag 、S标签肽
- 编号：188345
- 三字母：H2N-Lys-Glu-Thr-Ala-Ala-Ala-Lys-Phe-Glu-Arg-Gln-His-Met-Asp-Ser-COOH
- 描述：S Tag sequence is a novel fusion peptide tag for recombinant proteins that allows detection by a rapid, sensitive homogeneous assay or by colorimetric detection in Western blots. S Tag can be applied to purification of target proteins.
- 标签多肽Avi Tag
- 编号：176180
- 三字母：H2N-Gly-Leu-Asn-Asp-Ile-Phe-Glu-Ala-Gln-Lys-Ile-Glu-Trp-His-Glu-COOH
- 描述：AviTag标签具有一个单生物素化赖氨酸位点，与已知天然可生物素化序列完全不同，可以加在目标蛋白的N端和C端。(专肽生物)融合表达后，可被生物素连接酶生物素化，为了纯化重组蛋白选用低亲和性的单体抗生物素蛋白或抗生物素蛋白衍生物，除了用于蛋白质分离纯化，还用于蛋白质相互作用研究。
- 标签多肽Isopep tag
- 编号：171917
- 三字母：H2N-Thr-Asp-Lys-Asp-Met-Thr-Ile-Thr-Phe-Thr-Asn-Lys-Lys-Asp-Ala-Glu-COOH
- 标签多肽3X FLAG peptide
- 编号：184546
- CAS号：402750-12-3
- 三字母：H2N-Met-Asp-Tyr-Lys-Asp-His-Asp-Gly-Asp-Tyr-Lys-Asp-His-Asp-Ile-Asp-Tyr-Lys-Asp-Asp-Asp-Asp-Lys-COOH
- 描述：一种合成的多肽，包含三个重复的 Asp-Tyr-Lys-Xaa-Xaa-Asp 基序。
- 标签多肽 Calmodulin tag
- 编号：188452
- 三字母：H2N-Lys-Arg-Arg-Trp-Lys-Lys-Asn-Phe-Ile-Ala-Val-Ser-Ala-Ala-Asn-Arg-Phe-Lys-Lys-Ile-Ser-Ser-Ser-Gly-Ala-Leu-COOH
- 标签多肽3x Hemagglutinin (HA) Tag
- 编号：153859
- 三字母：H2N-Met-Glu-Tyr-Pro-Tyr-Asp-Val-Pro-Asp-Tyr-Ala-Ala-Glu-Tyr-Pro-Tyr-Asp-Val-Pro-Asp-Tyr-Ala-Ala-Glu-Tyr-Pro-Tyr-Asp-Val-Pro-Asp-Tyr-Ala-Ala-Lys-Leu-Glu-COOH
- 标签多肽SBP-tag
- 编号：194101
- 三字母：H2N-Met-Asp-Glu-Lys-Thr-Thr-Gly-Trp-Arg-Gly-Gly-His-Val-Val-Glu-Gly-Leu-Ala-Gly-Glu-Leu-Glu-Gln-Leu-Arg-Ala-Arg-Leu-Glu-His-His-Pro-Gln-Gly-Gln-Arg-Glu-Pro-COOH
多肽H2N-Met-Glu-Tyr-Pro-Tyr-Asp-Val-Pro-Asp-Tyr-Ala-Ala-Glu-Tyr-Pro-Tyr-Asp-Val-Pro-Asp-Tyr-Ala-Ala-Glu-Tyr-Pro-Tyr-Asp-Val-Pro-Asp-Tyr-Ala-Ala-Lys-Leu-Glu-COOH的合成步骤：

1、合成CTC树脂：称取2.03g CTC Resin（如初始取代度约为0.65mmol/g）和1.58mmol Fmoc-Glu(OtBu)-OH于反应器中，加入适量DCM溶解氨基酸（需要注意，此时CTC树脂体积会增大好几倍，避免DCM溶液过少），再加入3.96mmol DIPEA（Mw：129.1,d：0.740g/ml），反应2-3小时后，可不抽滤溶液，直接加入1ml的HPLC级甲醇，封端半小时。依次用DMF洗涤2次，甲醇洗涤1次，DCM洗涤一次，甲醇洗涤一次，DCM洗涤一次，DMF洗涤2次（这里使用甲醇和DCM交替洗涤，是为了更好地去除其他溶质，有利于后续反应）。得到 Fmoc-Glu(OtBu)-CTC Resin。结构图如下：

2、脱Fmoc：加3倍树脂体积的20%Pip/DMF溶液，鼓氮气30分钟，然后2倍树脂体积的DMF 洗涤5次。得到 H2N-Glu(OtBu)-CTC Resin 。（此步骤脱除Fmoc基团，茚三酮检测为蓝色，Pip为哌啶）。结构图如下：

3、缩合：取3.96mmol Fmoc-Leu-OH 氨基酸，加入到上述树脂里，加适当DMF溶解氨基酸，再依次加入7.92mmol DIPEA，3.76mmol HBTU。反应30分钟后，取小样洗涤，茚三酮检测为无色。用2倍树脂体积的DMF 洗涤3次树脂。（洗涤树脂，去掉残留溶剂，为下一步反应做准备）。得到Fmoc-Leu-Glu(OtBu)-CTC Resin。氨基酸：DIPEA：HBTU：树脂=3：6：2.85：1（摩尔比）。结构图如下：

4、依次循环步骤二、步骤三，依次得到

H2N-Leu-Glu(OtBu)-CTC Resin

Fmoc-Lys(Boc)-Leu-Glu(OtBu)-CTC Resin

H2N-Lys(Boc)-Leu-Glu(OtBu)-CTC Resin

Fmoc-Ala-Lys(Boc)-Leu-Glu(OtBu)-CTC Resin

H2N-Ala-Lys(Boc)-Leu-Glu(OtBu)-CTC Resin

Fmoc-Ala-Ala-Lys(Boc)-Leu-Glu(OtBu)-CTC Resin

H2N-Ala-Ala-Lys(Boc)-Leu-Glu(OtBu)-CTC Resin

Fmoc-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Lys(Boc)-Leu-Glu(OtBu)-CTC Resin

H2N-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Lys(Boc)-Leu-Glu(OtBu)-CTC Resin

Fmoc-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Lys(Boc)-Leu-Glu(OtBu)-CTC Resin

H2N-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Lys(Boc)-Leu-Glu(OtBu)-CTC Resin

Fmoc-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Lys(Boc)-Leu-Glu(OtBu)-CTC Resin

H2N-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Lys(Boc)-Leu-Glu(OtBu)-CTC Resin

Fmoc-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Lys(Boc)-Leu-Glu(OtBu)-CTC Resin

H2N-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Lys(Boc)-Leu-Glu(OtBu)-CTC Resin

Fmoc-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Lys(Boc)-Leu-Glu(OtBu)-CTC Resin

H2N-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Lys(Boc)-Leu-Glu(OtBu)-CTC Resin

Fmoc-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Lys(Boc)-Leu-Glu(OtBu)-CTC Resin

H2N-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Lys(Boc)-Leu-Glu(OtBu)-CTC Resin

Fmoc-Pro-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Lys(Boc)-Leu-Glu(OtBu)-CTC Resin

H2N-Pro-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Lys(Boc)-Leu-Glu(OtBu)-CTC Resin

Fmoc-Tyr(tBu)-Pro-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Lys(Boc)-Leu-Glu(OtBu)-CTC Resin

H2N-Tyr(tBu)-Pro-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Lys(Boc)-Leu-Glu(OtBu)-CTC Resin

Fmoc-Glu(OtBu)-Tyr(tBu)-Pro-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Lys(Boc)-Leu-Glu(OtBu)-CTC Resin

H2N-Glu(OtBu)-Tyr(tBu)-Pro-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Lys(Boc)-Leu-Glu(OtBu)-CTC Resin

Fmoc-Ala-Glu(OtBu)-Tyr(tBu)-Pro-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Lys(Boc)-Leu-Glu(OtBu)-CTC Resin

H2N-Ala-Glu(OtBu)-Tyr(tBu)-Pro-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Lys(Boc)-Leu-Glu(OtBu)-CTC Resin

Fmoc-Ala-Ala-Glu(OtBu)-Tyr(tBu)-Pro-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Lys(Boc)-Leu-Glu(OtBu)-CTC Resin

H2N-Ala-Ala-Glu(OtBu)-Tyr(tBu)-Pro-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Lys(Boc)-Leu-Glu(OtBu)-CTC Resin

Fmoc-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Glu(OtBu)-Tyr(tBu)-Pro-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Lys(Boc)-Leu-Glu(OtBu)-CTC Resin

H2N-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Glu(OtBu)-Tyr(tBu)-Pro-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Lys(Boc)-Leu-Glu(OtBu)-CTC Resin

Fmoc-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Glu(OtBu)-Tyr(tBu)-Pro-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Lys(Boc)-Leu-Glu(OtBu)-CTC Resin

H2N-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Glu(OtBu)-Tyr(tBu)-Pro-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Lys(Boc)-Leu-Glu(OtBu)-CTC Resin

Fmoc-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Glu(OtBu)-Tyr(tBu)-Pro-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Lys(Boc)-Leu-Glu(OtBu)-CTC Resin

H2N-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Glu(OtBu)-Tyr(tBu)-Pro-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Lys(Boc)-Leu-Glu(OtBu)-CTC Resin

Fmoc-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Glu(OtBu)-Tyr(tBu)-Pro-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Lys(Boc)-Leu-Glu(OtBu)-CTC Resin

H2N-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Glu(OtBu)-Tyr(tBu)-Pro-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Lys(Boc)-Leu-Glu(OtBu)-CTC Resin

Fmoc-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Glu(OtBu)-Tyr(tBu)-Pro-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Lys(Boc)-Leu-Glu(OtBu)-CTC Resin

H2N-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Glu(OtBu)-Tyr(tBu)-Pro-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Lys(Boc)-Leu-Glu(OtBu)-CTC Resin

Fmoc-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Glu(OtBu)-Tyr(tBu)-Pro-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Lys(Boc)-Leu-Glu(OtBu)-CTC Resin

H2N-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Glu(OtBu)-Tyr(tBu)-Pro-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Lys(Boc)-Leu-Glu(OtBu)-CTC Resin

Fmoc-Pro-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Glu(OtBu)-Tyr(tBu)-Pro-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Lys(Boc)-Leu-Glu(OtBu)-CTC Resin

H2N-Pro-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Glu(OtBu)-Tyr(tBu)-Pro-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Lys(Boc)-Leu-Glu(OtBu)-CTC Resin

Fmoc-Tyr(tBu)-Pro-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Glu(OtBu)-Tyr(tBu)-Pro-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Lys(Boc)-Leu-Glu(OtBu)-CTC Resin

H2N-Tyr(tBu)-Pro-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Glu(OtBu)-Tyr(tBu)-Pro-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Lys(Boc)-Leu-Glu(OtBu)-CTC Resin

Fmoc-Glu(OtBu)-Tyr(tBu)-Pro-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Glu(OtBu)-Tyr(tBu)-Pro-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Lys(Boc)-Leu-Glu(OtBu)-CTC Resin

H2N-Glu(OtBu)-Tyr(tBu)-Pro-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Glu(OtBu)-Tyr(tBu)-Pro-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Lys(Boc)-Leu-Glu(OtBu)-CTC Resin

Fmoc-Ala-Glu(OtBu)-Tyr(tBu)-Pro-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Glu(OtBu)-Tyr(tBu)-Pro-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Lys(Boc)-Leu-Glu(OtBu)-CTC Resin

H2N-Ala-Glu(OtBu)-Tyr(tBu)-Pro-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Glu(OtBu)-Tyr(tBu)-Pro-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Lys(Boc)-Leu-Glu(OtBu)-CTC Resin

Fmoc-Ala-Ala-Glu(OtBu)-Tyr(tBu)-Pro-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Glu(OtBu)-Tyr(tBu)-Pro-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Lys(Boc)-Leu-Glu(OtBu)-CTC Resin

H2N-Ala-Ala-Glu(OtBu)-Tyr(tBu)-Pro-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Glu(OtBu)-Tyr(tBu)-Pro-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Lys(Boc)-Leu-Glu(OtBu)-CTC Resin

Fmoc-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Glu(OtBu)-Tyr(tBu)-Pro-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Glu(OtBu)-Tyr(tBu)-Pro-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Lys(Boc)-Leu-Glu(OtBu)-CTC Resin

H2N-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Glu(OtBu)-Tyr(tBu)-Pro-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Glu(OtBu)-Tyr(tBu)-Pro-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Lys(Boc)-Leu-Glu(OtBu)-CTC Resin

Fmoc-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Glu(OtBu)-Tyr(tBu)-Pro-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Glu(OtBu)-Tyr(tBu)-Pro-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Lys(Boc)-Leu-Glu(OtBu)-CTC Resin

H2N-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Glu(OtBu)-Tyr(tBu)-Pro-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Glu(OtBu)-Tyr(tBu)-Pro-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Lys(Boc)-Leu-Glu(OtBu)-CTC Resin

Fmoc-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Glu(OtBu)-Tyr(tBu)-Pro-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Glu(OtBu)-Tyr(tBu)-Pro-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Lys(Boc)-Leu-Glu(OtBu)-CTC Resin

H2N-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Glu(OtBu)-Tyr(tBu)-Pro-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Glu(OtBu)-Tyr(tBu)-Pro-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Lys(Boc)-Leu-Glu(OtBu)-CTC Resin

Fmoc-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Glu(OtBu)-Tyr(tBu)-Pro-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Glu(OtBu)-Tyr(tBu)-Pro-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Lys(Boc)-Leu-Glu(OtBu)-CTC Resin

H2N-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Glu(OtBu)-Tyr(tBu)-Pro-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Glu(OtBu)-Tyr(tBu)-Pro-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Lys(Boc)-Leu-Glu(OtBu)-CTC Resin

Fmoc-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Glu(OtBu)-Tyr(tBu)-Pro-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Glu(OtBu)-Tyr(tBu)-Pro-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Lys(Boc)-Leu-Glu(OtBu)-CTC Resin

H2N-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Glu(OtBu)-Tyr(tBu)-Pro-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Glu(OtBu)-Tyr(tBu)-Pro-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Lys(Boc)-Leu-Glu(OtBu)-CTC Resin

Fmoc-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Glu(OtBu)-Tyr(tBu)-Pro-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Glu(OtBu)-Tyr(tBu)-Pro-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Lys(Boc)-Leu-Glu(OtBu)-CTC Resin

H2N-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Glu(OtBu)-Tyr(tBu)-Pro-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Glu(OtBu)-Tyr(tBu)-Pro-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Lys(Boc)-Leu-Glu(OtBu)-CTC Resin

Fmoc-Pro-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Glu(OtBu)-Tyr(tBu)-Pro-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Glu(OtBu)-Tyr(tBu)-Pro-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Lys(Boc)-Leu-Glu(OtBu)-CTC Resin

H2N-Pro-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Glu(OtBu)-Tyr(tBu)-Pro-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Glu(OtBu)-Tyr(tBu)-Pro-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Lys(Boc)-Leu-Glu(OtBu)-CTC Resin

Fmoc-Tyr(tBu)-Pro-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Glu(OtBu)-Tyr(tBu)-Pro-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Glu(OtBu)-Tyr(tBu)-Pro-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Lys(Boc)-Leu-Glu(OtBu)-CTC Resin

H2N-Tyr(tBu)-Pro-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Glu(OtBu)-Tyr(tBu)-Pro-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Glu(OtBu)-Tyr(tBu)-Pro-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Lys(Boc)-Leu-Glu(OtBu)-CTC Resin

Fmoc-Glu(OtBu)-Tyr(tBu)-Pro-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Glu(OtBu)-Tyr(tBu)-Pro-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Glu(OtBu)-Tyr(tBu)-Pro-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Lys(Boc)-Leu-Glu(OtBu)-CTC Resin

H2N-Glu(OtBu)-Tyr(tBu)-Pro-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Glu(OtBu)-Tyr(tBu)-Pro-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Glu(OtBu)-Tyr(tBu)-Pro-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Lys(Boc)-Leu-Glu(OtBu)-CTC Resin

Fmoc-Met-Glu(OtBu)-Tyr(tBu)-Pro-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Glu(OtBu)-Tyr(tBu)-Pro-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Glu(OtBu)-Tyr(tBu)-Pro-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Lys(Boc)-Leu-Glu(OtBu)-CTC Resin

以上中间结构，均可在专肽生物多肽计算器-多肽结构计算器中，一键画出。

最后再经过步骤二得到 H2N-Met-Glu(OtBu)-Tyr(tBu)-Pro-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Glu(OtBu)-Tyr(tBu)-Pro-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Glu(OtBu)-Tyr(tBu)-Pro-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-Ala-Lys(Boc)-Leu-Glu(OtBu)-CTC Resin，结构如下：

5、切割：6倍树脂体积的切割液（或每1g树脂加8ml左右的切割液），摇床摇晃 2小时，过滤掉树脂，用冰无水乙醚沉淀滤液，并用冰无水乙醚洗涤沉淀物3次，最后将沉淀物放真空干燥釜中，常温干燥24小试，得到粗品H2N-Met-Glu-Tyr-Pro-Tyr-Asp-Val-Pro-Asp-Tyr-Ala-Ala-Glu-Tyr-Pro-Tyr-Asp-Val-Pro-Asp-Tyr-Ala-Ala-Glu-Tyr-Pro-Tyr-Asp-Val-Pro-Asp-Tyr-Ala-Ala-Lys-Leu-Glu-COOH。结构图见产品结构图。

切割液选择：1）TFA：H2O=95%：5%

2）TFA：H2O：TIS=95%：2.5%：2.5%

3）三氟乙酸：茴香硫醚：1，2-乙二硫醇：苯酚：水=87.5%：5%：2.5%：2.5%：2.5%

（前两种适合没有容易氧化的氨基酸，例如Trp、Cys、Met。第三种适合几乎所有的序列。）

6、纯化冻干：使用液相色谱纯化，收集目标峰液体，进行冻干，获得蓬松的粉末状固体多肽。不过这时要取小样复测下纯度是否目标纯度。

7、最后总结：

杭州专肽生物技术有限公司（ALLPEPTIDE https://www.allpeptide.com）主营定制多肽合成业务，提供各类长肽，短肽，环肽，提供各类修饰肽，如：荧光标记修饰（CY3、CY5、CY5.5、CY7、FAM、FITC、Rhodamine B、TAMRA等），功能基团修饰肽（叠氮、炔基、DBCO、DOTA、NOTA等），同位素标记肽（N15、C13），订书肽（Stapled Peptide）,脂肪酸修饰肽（Pal、Myr、Ste），磷酸化修饰肽（P-Ser、P-Thr、P-Tyr），环肽（酰胺键环肽、一对或者多对二硫键环），生物素标记肽，PEG修饰肽，甲基化修饰肽等。

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