400-998-5282
专注多肽 服务科研

八肽肽V WQPPRARI构成纤连蛋白羧基端肝素结合结构域中发现的肝素结合氨基酸序列之一。
编号:186762
CAS号:125720-21-0
单字母:H2N-WQPPRARI-OH
Fibronectin Adhesion-Promoting Peptide is a polyclonal antibody that recognizes fibronectin, a glycoprotein found in the extracellular matrix. Fibronectin promotes cell adhesion and proliferation by binding to collagen. This antibody can be used to detect fibronectin in tissues from patients with cancer. It may also be used as a tool for identifying cancer cells that have metastasized to other sites in the body.
肝素结合多肽 V 含有正电荷残基,其排布可促进与糖胺聚糖的静电相互作用。结构取向有助于结合亲和力研究与折叠分析。主链柔性有助于复合物形成机制的探究。研究用途包括细胞外基质模拟与多肽相互作用定位。
Heparin-Binding Peptide V displays positively charged residues arranged to promote electrostatic interactions with glycosaminoglycans. Structural orientation supports binding-affinity studies and folding analysis. Backbone flexibility enhances exploration of complex-formation mechanisms. Research uses include extracellular-matrix modeling and peptide-interaction mapping.
Fibronectin Adhesion-promoting Peptide TFA (Heparin Binding Peptide TFA) 是一种肝素结合氨基酸序列,这段序列存在于纤连蛋白 C-端的肝素结合域中。Fibronectin Adhesion-promoting Peptide TFA 促进间充质干细胞 (MSC) 球状体组装成更大的聚集体。Fibronectin Adhesion-promoting Peptide TFA 通过与细胞的肝素结合区反应直接促进内皮细胞的粘附、扩散和迁移。
Fibronectin Adhesion-promoting Peptide (Heparin Binding Peptide) is one of the heparin-binding amino acid sequences found in the carboxy-terminal heparin-binding domain of fibronectin. It promotes assembly of mesenchymal stem cell (MSC) spheroids into larger aggregates. Fibronectin Adhesion-promoting Peptide directly promotes the adhesion, spreading, and migration of endothelial cells by reacting with heparin binding domains of cells[1][2][3].
多肽H2N-Trp-Gln-Pro-Pro-Arg-Ala-Arg-Ile-COOH的合成步骤:
1、合成CTC树脂:称取0.61g CTC Resin(如初始取代度约为0.76mmol/g)和0.56mmol Fmoc-Ile-OH于反应器中,加入适量DCM溶解氨基酸(需要注意,此时CTC树脂体积会增大好几倍,避免DCM溶液过少),再加入1.39mmol DIPEA(Mw:129.1,d:0.740g/ml),反应2-3小时后,可不抽滤溶液,直接加入1ml的HPLC级甲醇,封端半小时。依次用DMF洗涤2次,甲醇洗涤1次,DCM洗涤一次,甲醇洗涤一次,DCM洗涤一次,DMF洗涤2次(这里使用甲醇和DCM交替洗涤,是为了更好地去除其他溶质,有利于后续反应)。得到 Fmoc-Ile-CTC Resin。结构图如下:

2、脱Fmoc:加3倍树脂体积的20%Pip/DMF溶液,鼓氮气30分钟,然后2倍树脂体积的DMF 洗涤5次。得到 H2N-Ile-CTC Resin 。(此步骤脱除Fmoc基团,茚三酮检测为蓝色,Pip为哌啶)。结构图如下:

3、缩合:取1.39mmol Fmoc-Arg(Pbf)-OH 氨基酸,加入到上述树脂里,加适当DMF溶解氨基酸,再依次加入2.78mmol DIPEA,1.32mmol HBTU。反应30分钟后,取小样洗涤,茚三酮检测为无色。用2倍树脂体积的DMF 洗涤3次树脂。(洗涤树脂,去掉残留溶剂,为下一步反应做准备)。得到Fmoc-Arg(Pbf)-Ile-CTC Resin。氨基酸:DIPEA:HBTU:树脂=3:6:2.85:1(摩尔比)。结构图如下:

4、依次循环步骤二、步骤三,依次得到
H2N-Arg(Pbf)-Ile-CTC Resin
Fmoc-Ala-Arg(Pbf)-Ile-CTC Resin
H2N-Ala-Arg(Pbf)-Ile-CTC Resin
Fmoc-Arg(Pbf)-Ala-Arg(Pbf)-Ile-CTC Resin
H2N-Arg(Pbf)-Ala-Arg(Pbf)-Ile-CTC Resin
Fmoc-Pro-Arg(Pbf)-Ala-Arg(Pbf)-Ile-CTC Resin
H2N-Pro-Arg(Pbf)-Ala-Arg(Pbf)-Ile-CTC Resin
Fmoc-Pro-Pro-Arg(Pbf)-Ala-Arg(Pbf)-Ile-CTC Resin
H2N-Pro-Pro-Arg(Pbf)-Ala-Arg(Pbf)-Ile-CTC Resin
Fmoc-Gln(Trt)-Pro-Pro-Arg(Pbf)-Ala-Arg(Pbf)-Ile-CTC Resin
H2N-Gln(Trt)-Pro-Pro-Arg(Pbf)-Ala-Arg(Pbf)-Ile-CTC Resin
Fmoc-Trp(Boc)-Gln(Trt)-Pro-Pro-Arg(Pbf)-Ala-Arg(Pbf)-Ile-CTC Resin
以上中间结构,均可在专肽生物多肽计算器-多肽结构计算器中,一键画出。
最后再经过步骤二得到 H2N-Trp(Boc)-Gln(Trt)-Pro-Pro-Arg(Pbf)-Ala-Arg(Pbf)-Ile-CTC Resin,结构如下:

5、切割:6倍树脂体积的切割液(或每1g树脂加8ml左右的切割液),摇床摇晃 2小时,过滤掉树脂,用冰无水乙醚沉淀滤液,并用冰无水乙醚洗涤沉淀物3次,最后将沉淀物放真空干燥釜中,常温干燥24小试,得到粗品H2N-Trp-Gln-Pro-Pro-Arg-Ala-Arg-Ile-COOH。结构图见产品结构图。
切割液选择:1)TFA:H2O=95%:5%、TFA:H2O=97.5%:2.5%
2)TFA:H2O:TIS=95%:2.5%:2.5%
3)三氟乙酸:茴香硫醚:1,2-乙二硫醇:苯酚:水=87.5%:5%:2.5%:2.5%:2.5%
(前两种适合没有容易氧化的氨基酸,例如Trp、Cys、Met。第三种适合几乎所有的序列。)
6、纯化冻干:使用液相色谱纯化,收集目标峰液体,进行冻干,获得蓬松的粉末状固体多肽。不过这时要取小样复测下纯度 是否目标纯度。
7、最后总结:
杭州专肽生物技术有限公司(ALLPEPTIDE https://www.allpeptide.com)主营定制多肽合成业务,提供各类长肽,短肽,环肽,提供各类修饰肽,如:荧光标记修饰(CY3、CY5、CY5.5、CY7、FAM、FITC、Rhodamine B、TAMRA等),功能基团修饰肽(叠氮、炔基、DBCO、DOTA、NOTA等),同位素标记肽(N15、C13),订书肽(Stapled Peptide),脂肪酸修饰肽(Pal、Myr、Ste),磷酸化修饰肽(P-Ser、P-Thr、P-Tyr),环肽(酰胺键环肽、一对或者多对二硫键环),生物素标记肽,PEG修饰肽,甲基化修饰肽
以上所有内容,为专肽生物原创内容,请勿发布到其他网站上。





