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人 Tau 蛋白的多肽片段。Tau 蛋白功能紊乱与神经退化和痴呆有关系。
编号:200526
CAS号:
单字母:Ac-VQIINK-CONH2
编号: | 200526 |
中文名称: | Tau protein (592-597), Human TFA |
英文名: | Tau protein (592-597), Human TFA |
单字母: | Ac-VQIINK-CONH2 |
三字母: | Ac N端乙酰化封端,一种常见的修饰方式,常用于模拟蛋白质中的肽片段。 -ValL-缬氨酸:valine。系统命名为(2S)-氨基-3-甲基丁酸。是编码氨基酸。是哺乳动物的必需氨基酸。符号:V,Val。在某些放线菌素如缬霉素中存在 D-缬氨酸。 -GlnL-谷氨酰胺:glutamine。系统命名为(2S)-氨基-4-氨酰基丁酸,是编码氨基酸。符号:GIn,Q。 -IleL-异亮氨酸:isoleucine。系统命名为(2S)-氨基-(3R)-甲基戊酸。是编码氨基酸。有两个手性碳原子,是哺乳动物的必需氨基酸。符号:I,Ile。 -IleL-异亮氨酸:isoleucine。系统命名为(2S)-氨基-(3R)-甲基戊酸。是编码氨基酸。有两个手性碳原子,是哺乳动物的必需氨基酸。符号:I,Ile。 -Asn天冬酰胺:asparagine。L-天冬酰胺的系统命名为(2S)-氨基-3-氨酰基丙酸,是编码氨基酸。符号:N,Asn。D-天冬酰胺存在于短杆菌肽A分子中。 -LysL-赖氨酸:lysine。系统命名为(2S)-6-二氨基已酸。是编码氨基酸中的碱性氨基酸,哺乳动物的必需氨基酸。在蛋白质中的赖氨酸可以被修饰为多种形式的衍生物。符号:K,Lys。 -CONH2C端酰胺化 |
氨基酸个数: | 6 |
分子式: | C34H62O9N10 |
平均分子量: | 754.92 |
精确分子量: | 754.47 |
等电点(PI): | - |
pH=7.0时的净电荷数: | 1 |
平均亲水性: | -0.28333333333333 |
疏水性值: | 0.38 |
消光系数: | - |
来源: | 人工化学合成,仅限科学研究使用,不得用于人体。 |
储存条件: | 负80℃至负20℃ |
标签: | 未分类肽 |
Tau protein (592-597), human TFA 是人 Tau 蛋白的多肽片段。Tau 蛋白功能紊乱与神经退化和痴呆有关系。
Tau protein (592-597), human TFA is a peptide fragment of human Tau protein. The dysfunction of Tau protein is involved in neurodegeneration and dementia[1].
DOI | 名称 | |
---|---|---|
10.1186/s40478-019-0695-5 | Assembly of transgenic human P301S Tau is necessary for neurodegeneration in murine spinal cord | 下载 |
多肽Ac-Val-Gln-Ile-Ile-Asn-Lys-NH2的合成步骤:
1、合成MBHA树脂:取若干克MBHA树脂(如初始取代度为0.5mmol/g)和1倍树脂摩尔量的Fmoc-Linker-OH加入到反应器中,加入DMF,搅拌使氨基酸完全溶解。再加入树脂2倍量的DIEPA,搅拌混合均匀。再加入树脂0.95倍量的HBTU,搅拌混合均匀。反应3-4小时后,用DMF洗涤3次。用2倍树脂体积的10%乙酸酐/DMF 进行封端30分钟。然后再用DMF洗涤3次,甲醇洗涤2次,DCM洗涤2次,再用甲醇洗涤2次。真空干燥12小时以上,得到干燥的树脂{Fmoc-Linker-MHBA Resin},测定取代度。这里测得取代度为 0.3mmol/g。结构如下图:
2、脱Fmoc:取1.22g的上述树脂,用DCM或DMF溶胀20分钟。用DMF洗涤2遍。加3倍树脂体积的20%Pip/DMF溶液,鼓氮气30分钟,然后2倍树脂体积的DMF 洗涤5次。得到 H2N-Linker-MBHA Resin 。(此步骤脱除Fmoc基团,茚三酮检测为蓝色,Pip为哌啶)。结构图如下:
3、缩合:取1.1mmol Fmoc-Lys(Boc)-OH 氨基酸,加入到上述树脂里,加适当DMF溶解氨基酸,再依次加入2.2mmol DIPEA,1.04mmol HBTU。反应30分钟后,取小样洗涤,茚三酮检测为无色。用2倍树脂体积的DMF 洗涤3次树脂。(洗涤树脂,去掉残留溶剂,为下一步反应做准备)。得到Fmoc-Lys(Boc)-Linker-MBHA Resin。氨基酸:DIPEA:HBTU:树脂=3:6:2.85:1(摩尔比)。结构图如下:
4、依次循环步骤二、步骤三,依次得到
H2N-Lys(Boc)-Linker-MBHA Resin
Fmoc-Asn(Trt)-Lys(Boc)-Linker-MBHA Resin
H2N-Asn(Trt)-Lys(Boc)-Linker-MBHA Resin
Fmoc-Ile-Asn(Trt)-Lys(Boc)-Linker-MBHA Resin
H2N-Ile-Asn(Trt)-Lys(Boc)-Linker-MBHA Resin
Fmoc-Ile-Ile-Asn(Trt)-Lys(Boc)-Linker-MBHA Resin
H2N-Ile-Ile-Asn(Trt)-Lys(Boc)-Linker-MBHA Resin
Fmoc-Gln(Trt)-Ile-Ile-Asn(Trt)-Lys(Boc)-Linker-MBHA Resin
H2N-Gln(Trt)-Ile-Ile-Asn(Trt)-Lys(Boc)-Linker-MBHA Resin
Fmoc-Val-Gln(Trt)-Ile-Ile-Asn(Trt)-Lys(Boc)-Linker-MBHA Resin
以上中间结构,均可在专肽生物多肽计算器-多肽结构计算器中,一键画出。
最后再经过步骤二得到 H2N-Val-Gln(Trt)-Ile-Ile-Asn(Trt)-Lys(Boc)-Linker-MBHA Resin,结构如下:
5、乙酸酐反应连接:在上述树脂中,加入适当DMF后,再加入1.1mmol乙酸酐到树脂中,再加入2.2mmol DIPEA,鼓氮气反应30分钟。用2倍树脂体积的DMF 洗涤3次树脂(洗涤树脂,去掉残留溶剂,为下一步反应做准备)。 得到Ac-Val-Gln(Trt)-Ile-Ile-Asn(Trt)-Lys(Boc)-Linker-MBHAResin。 结构如下:
6、切割:6倍树脂体积的切割液(或每1g树脂加8ml左右的切割液),摇床摇晃 2小时,过滤掉树脂,用冰无水乙醚沉淀滤液,并用冰无水乙醚洗涤沉淀物3次,最后将沉淀物放真空干燥釜中,常温干燥24小试,得到粗品Ac-Val-Gln-Ile-Ile-Asn-Lys-NH2。结构图见产品结构图。
切割液选择:1)TFA:H2O=95%:5%
2)TFA:H2O:TIS=95%:2.5%:2.5%
3)三氟乙酸:茴香硫醚:1,2-乙二硫醇:苯酚:水=87.5%:5%:2.5%:2.5%:2.5%
(前两种适合没有容易氧化的氨基酸,例如Trp、Cys、Met。第三种适合几乎所有的序列。)
7、纯化冻干:使用液相色谱纯化,收集目标峰液体,进行冻干,获得蓬松的粉末状固体多肽。不过这时要取小样复测下纯度 是否目标纯度。
8、最后总结:
杭州专肽生物技术有限公司(ALLPEPTIDE https://www.allpeptide.com)主营定制多肽合成业务,提供各类长肽,短肽,环肽,提供各类修饰肽,如:荧光标记修饰(CY3、CY5、CY5.5、CY7、FAM、FITC、Rhodamine B、TAMRA等),功能基团修饰肽(叠氮、炔基、DBCO、DOTA、NOTA等),同位素标记肽(N15、C13),订书肽(Stapled Peptide),脂肪酸修饰肽(Pal、Myr、Ste),磷酸化修饰肽(P-Ser、P-Thr、P-Tyr),环肽(酰胺键环肽、一对或者多对二硫键环),生物素标记肽,PEG修饰肽,甲基化修饰肽
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