DBCO(二苯并环辛炔)试剂是用于应变促进的炔叠氮化物环加成(SPAAC)的最具反应性的环炔之一,可实现无铜点击化学。
实验技术:多肽合成是一个固相合成顺序一般从C端(羧基端)向 N端(氨基端)合成。过去的多肽合成是在溶液中进行的称为液相合成法。从1963年Merrifield发展成功了固相多肽合成方法以来,经过不断的改进 和完善,到今天固相法已成为多肽和蛋白质合成中的一个常用技术,表现出了经典液相合成法无法比拟的优点,从而大大的减轻了每步产品提纯的难度。多肽合成总的来说分成两种:固相合成和液相多肽合成。
今天小编闲来没事,就以“定制多肽合成”为主题,聊一聊自己的理解。 目前市场上做定制多肽合成服务的公司,基本都是使用Fmoc固相多肽合成技术来合成对应序列的多肽序列,此技术是一种纯化学合成的方法。生物体内生成肽段的方向是从N端到C端,而化学合成的方向相反,是从C端往N端一个一个氨基酸的添加,最终形成完整的肽段。 至于化学合成方法怎么一个一个添加氨基酸,之前写过很多,这里就不多介绍了,可关注微信公众号“定制多肽合成”。
常见的多肽合成用树脂,CTC resin、Wang Resin、AM resin、MBHA resin。
目前多肽的合成技术已经很成熟,但是在多肽合成过程中有时会发生DG重排或者天冬氨酸酰胺化,导致杂质峰离目标峰很贴近,而很难纯化甚至无法分离。从而导致产率降低,为解决此类问题,今天介绍一种Asp的侧链保护基,氰基亚硫酰基,简称CYS。此类方法可有效的减少DG重排和Asp酰胺化导致的杂质,大大提高合成,纯化效率。 后面关于DG重排和Asp酰胺化等类似副反应,统称为D酰胺化。
多肽化学合成方法,包括液相和固相两种方法。液相合成方法现在主要采用 Boc 和 Z 两种保护方法,现在主要应用在短肽合成,如阿斯巴甜,力肽,催产素等,其相对与固相合 成,具有保护基选择多,成本低廉,合成规模容易放大的许多优点。与固相合成比较,液相 合成主要缺点是,合成范围小,一般都集中在 10 个氨基酸以内的多肽合成,还有合成中需 要对中间体进行提纯,时间长,工作量大。固相合成方法现在主要采用 Fmoc 和 Boc 两种方 法,它具有合成方便,迅速,容易实现自动化,而且可以比较容易的合成到 30 个氨基酸左 右多肽。
木书从多肽合成的一般方法、多肽合成方法学评述,多肽纯化与均一 性、多肽的立体化学,预测部肽立体化学的经验方法、生物活性多肽及声肽 药物设计中的新思维等七个方面论述了多肽及相关药物在合成、构象(包 括各种现代仪器及教学方法的应用)、活性、设计等方面的历史发展及前 沿。 本书可供从事药学、尖学、生物単及结构、化学和光谱仪器等学科的 教学、科研人员及相应学科的本科生、硕士、 博土研究生等阅读。