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Laminin (925-933) 是来源于层粘连蛋白受体结合的层粘连蛋白B1链的925-933残基中的肽段。
Laminin (925-933) is a peptide derived from residues 925-933 of the Laminin B1 chain that binds to the laminin receptor.

层粘连蛋白（925-933）是一种来源于层粘连蛋白B1链925-933残基的多肽（Cys-Asp-Pro-Gly-Tyr-Ile-Gly-Ser-Arg），与层粘连蛋白受体结合。

层粘连蛋白属于细胞外基质糖蛋白家族，是基底膜的主要非胶原成分。它们参与多种生物学过程，包括细胞粘着、分化、迁移、信号通路、突起生长和癌转移。层粘连蛋白由3条不同的链组成，分别为层粘连蛋白α、β和γ（以前分别称为A、B1和B2）。

层粘连蛋白β1链有7个结构上不同的区域，这是与其它β链异构体共有的部分。层粘连蛋白β1在大多数产生基底膜的组织中表达，是组成层粘连蛋白1的3条链之一。层粘连蛋白1是从Engelbreth-Holm-Swarm（EHS）肿瘤中分离到的第一个层粘连蛋白。β1链中参与细胞附着、趋化作用和与层粘连蛋白受体结合的序列已被鉴定到，其具有抑制癌转移的能力。

参考文献：

1.Ikonen J, Pikkarainen T, Savolainen ER, Tryggvason K (Feb 1989). "A Hpa I polymorphism in the human laminin B1 chain gene on 7q22". Nucleic Acids Res 17 (1): 473.

2.Roche KB, Moore JW, Surana RB, Wilson BE (May 1989). "Aortic root dilatation associated with partial trisomy 7(q31.2----qter)". Pediatr Cardiol 10 (1): 53–5.

3.Bonneau D, Huret JL, Godeau G, Couet D, Putterman M, Tanzer J, Babin P, Larregue M (Sep 1991). "Recurrent ctb(7)(q31.3) and possible laminin involvement in a neonatal cutis laxa with a Marfan phenotype". Hum Genet 87 (3): 317–9. 

Laminins are the protein network that is the foundation for most cells and organs. They are large trimeric proteins, also in the family of glycoproteins that contain an alpha chain, a beta chain and a gamma chain which are found in five, three and three genetic variants. As a family of glycoproteins, laminins are an integral part of the structural scaffolding in almost every tissue of an organism. This makes the laminin a vital part of the maintenance and survival of the tissues. Consequently, defective laminins cause muscular dystrophy, junctional epidermolysis bullosa and defects of the kidney a defect.

Recently, publications have shown that laminins can be used to culture cells that are difficult to culture on other substrates. These trimeric glycoproteins form a similar structure to a cross, giving it a structure that has the ability to bind to other cell membrane and extracellular molecules. The three shorter arms of the laminin are particularly efficient at binding to other laminin molecules, which allows them to form larger sheets. The long arm is capable of binding to cells, which then helps anchor organized tissue cells to the membrane. These laminins are an important and biologically active part of the basal lamina, influenincing cell differentiation, migration and adhesion.

Nelson J, et al. Murine epidermal growth factor (EGF) fragment (33-42) inhibits both EGF- and laminin-dependent endothelial cell motility and angiogenesis. Cancer Res. 1995 Sep 1;55(17):3772-6. : https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/7543818

多肽H2N-Cys-Asp-Pro-Gly-Tyr-Ile-Gly-Ser-Arg-COOH的合成步骤：

1、合成CTC树脂：称取2.25g CTC Resin（如初始取代度约为0.74mmol/g）和2.0mmol Fmoc-Arg(Pbf)-OH于反应器中，加入适量DCM溶解氨基酸（需要注意，此时CTC树脂体积会增大好几倍，避免DCM溶液过少），再加入5.0mmol DIPEA（Mw：129.1,d：0.740g/ml），反应2-3小时后，可不抽滤溶液，直接加入1ml的HPLC级甲醇，封端半小时。依次用DMF洗涤2次，甲醇洗涤1次，DCM洗涤一次，甲醇洗涤一次，DCM洗涤一次，DMF洗涤2次（这里使用甲醇和DCM交替洗涤，是为了更好地去除其他溶质，有利于后续反应）。得到  Fmoc-Arg(Pbf)-CTC Resin。结构图如下：

2、脱Fmoc：加3倍树脂体积的20%Pip/DMF溶液，鼓氮气30分钟，然后2倍树脂体积的DMF 洗涤5次。得到 H2N-Arg(Pbf)-CTC Resin 。（此步骤脱除Fmoc基团，茚三酮检测为蓝色，Pip为哌啶）。结构图如下：

3、缩合：取5.0mmol Fmoc-Ser(tBu)-OH 氨基酸，加入到上述树脂里，加适当DMF溶解氨基酸，再依次加入9.99mmol DIPEA，4.75mmol HBTU。反应30分钟后，取小样洗涤，茚三酮检测为无色。用2倍树脂体积的DMF 洗涤3次树脂。（洗涤树脂，去掉残留溶剂，为下一步反应做准备）。得到Fmoc-Ser(tBu)-Arg(Pbf)-CTC Resin。氨基酸：DIPEA：HBTU：树脂=3：6：2.85：1（摩尔比）。结构图如下：

4、依次循环步骤二、步骤三，依次得到

H2N-Ser(tBu)-Arg(Pbf)-CTC Resin

Fmoc-Gly-Ser(tBu)-Arg(Pbf)-CTC Resin

H2N-Gly-Ser(tBu)-Arg(Pbf)-CTC Resin

Fmoc-Ile-Gly-Ser(tBu)-Arg(Pbf)-CTC Resin

H2N-Ile-Gly-Ser(tBu)-Arg(Pbf)-CTC Resin

Fmoc-Tyr(tBu)-Ile-Gly-Ser(tBu)-Arg(Pbf)-CTC Resin

H2N-Tyr(tBu)-Ile-Gly-Ser(tBu)-Arg(Pbf)-CTC Resin

Fmoc-Gly-Tyr(tBu)-Ile-Gly-Ser(tBu)-Arg(Pbf)-CTC Resin

H2N-Gly-Tyr(tBu)-Ile-Gly-Ser(tBu)-Arg(Pbf)-CTC Resin

Fmoc-Pro-Gly-Tyr(tBu)-Ile-Gly-Ser(tBu)-Arg(Pbf)-CTC Resin

H2N-Pro-Gly-Tyr(tBu)-Ile-Gly-Ser(tBu)-Arg(Pbf)-CTC Resin

Fmoc-Asp(OtBu)-Pro-Gly-Tyr(tBu)-Ile-Gly-Ser(tBu)-Arg(Pbf)-CTC Resin

H2N-Asp(OtBu)-Pro-Gly-Tyr(tBu)-Ile-Gly-Ser(tBu)-Arg(Pbf)-CTC Resin

Fmoc-Cys(Trt)-Asp(OtBu)-Pro-Gly-Tyr(tBu)-Ile-Gly-Ser(tBu)-Arg(Pbf)-CTC Resin

以上中间结构，均可在专肽生物多肽计算器-多肽结构计算器中，一键画出。

最后再经过步骤二得到 H2N-Cys(Trt)-Asp(OtBu)-Pro-Gly-Tyr(tBu)-Ile-Gly-Ser(tBu)-Arg(Pbf)-CTC Resin，结构如下：

5、切割：6倍树脂体积的切割液（或每1g树脂加8ml左右的切割液），摇床摇晃 2小时，过滤掉树脂，用冰无水乙醚沉淀滤液，并用冰无水乙醚洗涤沉淀物3次，最后将沉淀物放真空干燥釜中，常温干燥24小试，得到粗品H2N-Cys-Asp-Pro-Gly-Tyr-Ile-Gly-Ser-Arg-COOH。结构图见产品结构图。

切割液选择：1）TFA：H2O=95%：5%、TFA：H2O=97.5%：2.5%

2）TFA：H2O：TIS=95%：2.5%：2.5%

3）三氟乙酸：茴香硫醚：1，2-乙二硫醇：苯酚：水=87.5%：5%：2.5%：2.5%：2.5%

（前两种适合没有容易氧化的氨基酸，例如Trp、Cys、Met。第三种适合几乎所有的序列。）

6、纯化冻干：使用液相色谱纯化，收集目标峰液体，进行冻干，获得蓬松的粉末状固体多肽。不过这时要取小样复测下纯度 是否目标纯度。

7、最后总结：

杭州专肽生物技术有限公司（ALLPEPTIDE https://www.allpeptide.com）主营定制多肽合成业务，提供各类长肽，短肽，环肽，提供各类修饰肽，如：荧光标记修饰（CY3、CY5、CY5.5、CY7、FAM、FITC、Rhodamine B、TAMRA等），功能基团修饰肽（叠氮、炔基、DBCO、DOTA、NOTA等），同位素标记肽（N15、C13），订书肽（Stapled Peptide）,脂肪酸修饰肽（Pal、Myr、Ste），磷酸化修饰肽（P-Ser、P-Thr、P-Tyr），环肽（酰胺键环肽、一对或者多对二硫键环），生物素标记肽，PEG修饰肽，甲基化修饰肽

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