尿皮质素 II（小鼠）对 2 型 CRF 受体 (CRF-R2) 的两种剪接变体表现出比对 CRF-R1 高得多的亲和力。Ucn II（小鼠）激活 CRF-R2α 和 CRF-R2β 的效力几乎与尿皮质素（大鼠）相当。
编号：191429
CAS号：330648-32-3
单字母：H2N-VILSLDVPIGLLRILLEQARYKAARNQAATNAQILAHV-NH2
| 编号: | 191429 |
| 中文名称: | 尿皮质素II、Urocortin II, mouse |
| 英文名: | Urocortin II, mouse |
| CAS号: | 330648-32-3 |
| 单字母: | H2N-VILSLDVPIGLLRILLEQARYKAARNQAATNAQILAHV-NH2 |
| 三字母: | H2N N端氨基 -Val缬氨酸 -Ile异亮氨酸 -Leu亮氨酸 -Ser丝氨酸 -Leu亮氨酸 -Asp天冬氨酸 -Val缬氨酸 -Pro脯氨酸 -Ile异亮氨酸 -Gly甘氨酸 -Leu亮氨酸 -Leu亮氨酸 -Arg精氨酸 -Ile异亮氨酸 -Leu亮氨酸 -Leu亮氨酸 -Glu谷氨酸 -Gln谷氨酰胺 -Ala丙氨酸 -Arg精氨酸 -Tyr酪氨酸 -Lys赖氨酸 -Ala丙氨酸 -Ala丙氨酸 -Arg精氨酸 -Asn天冬酰胺 -Gln谷氨酰胺 -Ala丙氨酸 -Ala丙氨酸 -Thr苏氨酸 -Asn天冬酰胺 -Ala丙氨酸 -Gln谷氨酰胺 -Ile异亮氨酸 -Leu亮氨酸 -Ala丙氨酸 -His组氨酸 -Val缬氨酸 -NH2C端酰胺化 |
| 氨基酸个数: | 38 |
| 分子式: | C187H320N56O50 |
| 平均分子量: | 4152.89 |
| 精确分子量: | 4150.42 |
| 等电点(PI): | 12.23 |
| pH=7.0时的净电荷数: | 4.21 |
| 平均亲水性: | -0.35555555555556 |
| 疏水性值: | 0.53 |
| 外观与性状: | 白色粉末状固体 |
| 消光系数: | 1490 |
| 来源: | 人工化学合成，仅限科学研究使用，不得用于人体。 |
| 纯度: | 95%、98% |
| 盐体系: | 可选TFA、HAc、HCl或其它 |
| 生成周期: | 2-3周 |
| 储存条件: | 负80℃至负20℃ |
| 标签: | 尿皮素 |
尿皮质素 II（小鼠）对 2 型 CRF 受体 (CRF-R2) 的两种剪接变体表现出比对 CRF-R1 高得多的亲和力。Ucn II（小鼠）激活 CRF-R2α 和 CRF-R2β 的效力几乎与尿皮质素（大鼠）相当。
Urocortin II (mouse) exhibited considerably higher affinity for both splice variants of the type 2 CRF receptor (CRF-R2) than for CRF-R1. The potencies of Ucn II (mouse) in activating CRF-R2α and CRF-R2β were nearly equivalent to that of urocortin (rat).
| DOI | 名称 | |
|---|---|---|
| 10.1016/j.ygcen.2006.11.002 | Involvement of the corticotropin-releasing factor (CRF) type 2 receptor in CRF-induced thyrotropin release by the amphibian pituitary gland | 下载 |
| 10.1016/j.bcp.2004.07.013 | Cell-type specific calcium signaling by corticotropin-releasing factor type 1 (CRF1) and 2a (CRF2(a)) receptors: phospholipase C-mediated responses in human embryonic kidney 293 but not SK-N-MC neuroblastoma cells | 下载 |
多肽H2N-Val-Ile-Leu-Ser-Leu-Asp-Val-Pro-Ile-Gly-Leu-Leu-Arg-Ile-Leu-Leu-Glu-Gln-Ala-Arg-Tyr-Lys-Ala-Ala-Arg-Asn-Gln-Ala-Ala-Thr-Asn-Ala-Gln-Ile-Leu-Ala-His-Val-NH2的合成步骤：
1、合成MBHA树脂：取若干克的MBHA树脂（如初始取代度为0.5mmol/g）和1倍树脂摩尔量的Fmoc-Linker-OH加入到反应器中，加入DMF，搅拌使氨基酸完全溶解。再加入树脂2倍量的DIEPA，搅拌混合均匀。再加入树脂0.95倍量的HBTU，搅拌混合均匀。反应3-4小时后，用DMF洗涤3次。用2倍树脂体积的10%乙酸酐/DMF 进行封端30分钟。然后再用DMF洗涤3次，甲醇洗涤2次，DCM洗涤2次，再用甲醇洗涤2次。真空干燥12小时以上，得到干燥的树脂{Fmoc-Linker-MHBA Resin}，测定取代度。这里测得取代度为 0.3mmol/g。结构如下图：
2、脱Fmoc：取2.57g的上述树脂，用DCM或DMF溶胀20分钟。用DMF洗涤2遍。加3倍树脂体积的20%Pip/DMF溶液，鼓氮气30分钟，然后2倍树脂体积的DMF 洗涤5次。得到 H2N-Linker-MBHA Resin 。（此步骤脱除Fmoc基团，茚三酮检测为蓝色，Pip为哌啶）。结构图如下：
3、缩合：取2.31mmol Fmoc-Val-OH 氨基酸，加入到上述树脂里，加适当DMF溶解氨基酸，再依次加入4.63mmol DIPEA，2.2mmol HBTU。反应30分钟后，取小样洗涤，茚三酮检测为无色。用2倍树脂体积的DMF 洗涤3次树脂。（洗涤树脂，去掉残留溶剂，为下一步反应做准备）。得到Fmoc-Val-Linker-MBHA Resin。氨基酸：DIPEA：HBTU：树脂=3：6：2.85：1（摩尔比）。结构图如下：
4、依次循环步骤二、步骤三，依次得到
H2N-Val-Linker-MBHA Resin
Fmoc-His(Trt)-Val-Linker-MBHA Resin
H2N-His(Trt)-Val-Linker-MBHA Resin
Fmoc-Ala-His(Trt)-Val-Linker-MBHA Resin
H2N-Ala-His(Trt)-Val-Linker-MBHA Resin
Fmoc-Leu-Ala-His(Trt)-Val-Linker-MBHA Resin
H2N-Leu-Ala-His(Trt)-Val-Linker-MBHA Resin
Fmoc-Ile-Leu-Ala-His(Trt)-Val-Linker-MBHA Resin
H2N-Ile-Leu-Ala-His(Trt)-Val-Linker-MBHA Resin
Fmoc-Gln(Trt)-Ile-Leu-Ala-His(Trt)-Val-Linker-MBHA Resin
H2N-Gln(Trt)-Ile-Leu-Ala-His(Trt)-Val-Linker-MBHA Resin
Fmoc-Ala-Gln(Trt)-Ile-Leu-Ala-His(Trt)-Val-Linker-MBHA Resin
H2N-Ala-Gln(Trt)-Ile-Leu-Ala-His(Trt)-Val-Linker-MBHA Resin
Fmoc-Asn(Trt)-Ala-Gln(Trt)-Ile-Leu-Ala-His(Trt)-Val-Linker-MBHA Resin
H2N-Asn(Trt)-Ala-Gln(Trt)-Ile-Leu-Ala-His(Trt)-Val-Linker-MBHA Resin
Fmoc-Thr(tBu)-Asn(Trt)-Ala-Gln(Trt)-Ile-Leu-Ala-His(Trt)-Val-Linker-MBHA Resin
H2N-Thr(tBu)-Asn(Trt)-Ala-Gln(Trt)-Ile-Leu-Ala-His(Trt)-Val-Linker-MBHA Resin
Fmoc-Ala-Thr(tBu)-Asn(Trt)-Ala-Gln(Trt)-Ile-Leu-Ala-His(Trt)-Val-Linker-MBHA Resin
H2N-Ala-Thr(tBu)-Asn(Trt)-Ala-Gln(Trt)-Ile-Leu-Ala-His(Trt)-Val-Linker-MBHA Resin
Fmoc-Ala-Ala-Thr(tBu)-Asn(Trt)-Ala-Gln(Trt)-Ile-Leu-Ala-His(Trt)-Val-Linker-MBHA Resin
H2N-Ala-Ala-Thr(tBu)-Asn(Trt)-Ala-Gln(Trt)-Ile-Leu-Ala-His(Trt)-Val-Linker-MBHA Resin
Fmoc-Gln(Trt)-Ala-Ala-Thr(tBu)-Asn(Trt)-Ala-Gln(Trt)-Ile-Leu-Ala-His(Trt)-Val-Linker-MBHA Resin
H2N-Gln(Trt)-Ala-Ala-Thr(tBu)-Asn(Trt)-Ala-Gln(Trt)-Ile-Leu-Ala-His(Trt)-Val-Linker-MBHA Resin
Fmoc-Asn(Trt)-Gln(Trt)-Ala-Ala-Thr(tBu)-Asn(Trt)-Ala-Gln(Trt)-Ile-Leu-Ala-His(Trt)-Val-Linker-MBHA Resin
H2N-Asn(Trt)-Gln(Trt)-Ala-Ala-Thr(tBu)-Asn(Trt)-Ala-Gln(Trt)-Ile-Leu-Ala-His(Trt)-Val-Linker-MBHA Resin
Fmoc-Arg(Pbf)-Asn(Trt)-Gln(Trt)-Ala-Ala-Thr(tBu)-Asn(Trt)-Ala-Gln(Trt)-Ile-Leu-Ala-His(Trt)-Val-Linker-MBHA Resin
H2N-Arg(Pbf)-Asn(Trt)-Gln(Trt)-Ala-Ala-Thr(tBu)-Asn(Trt)-Ala-Gln(Trt)-Ile-Leu-Ala-His(Trt)-Val-Linker-MBHA Resin
Fmoc-Ala-Arg(Pbf)-Asn(Trt)-Gln(Trt)-Ala-Ala-Thr(tBu)-Asn(Trt)-Ala-Gln(Trt)-Ile-Leu-Ala-His(Trt)-Val-Linker-MBHA Resin
H2N-Ala-Arg(Pbf)-Asn(Trt)-Gln(Trt)-Ala-Ala-Thr(tBu)-Asn(Trt)-Ala-Gln(Trt)-Ile-Leu-Ala-His(Trt)-Val-Linker-MBHA Resin
Fmoc-Ala-Ala-Arg(Pbf)-Asn(Trt)-Gln(Trt)-Ala-Ala-Thr(tBu)-Asn(Trt)-Ala-Gln(Trt)-Ile-Leu-Ala-His(Trt)-Val-Linker-MBHA Resin
H2N-Ala-Ala-Arg(Pbf)-Asn(Trt)-Gln(Trt)-Ala-Ala-Thr(tBu)-Asn(Trt)-Ala-Gln(Trt)-Ile-Leu-Ala-His(Trt)-Val-Linker-MBHA Resin
Fmoc-Lys(Boc)-Ala-Ala-Arg(Pbf)-Asn(Trt)-Gln(Trt)-Ala-Ala-Thr(tBu)-Asn(Trt)-Ala-Gln(Trt)-Ile-Leu-Ala-His(Trt)-Val-Linker-MBHA Resin
H2N-Lys(Boc)-Ala-Ala-Arg(Pbf)-Asn(Trt)-Gln(Trt)-Ala-Ala-Thr(tBu)-Asn(Trt)-Ala-Gln(Trt)-Ile-Leu-Ala-His(Trt)-Val-Linker-MBHA Resin
Fmoc-Tyr(tBu)-Lys(Boc)-Ala-Ala-Arg(Pbf)-Asn(Trt)-Gln(Trt)-Ala-Ala-Thr(tBu)-Asn(Trt)-Ala-Gln(Trt)-Ile-Leu-Ala-His(Trt)-Val-Linker-MBHA Resin
H2N-Tyr(tBu)-Lys(Boc)-Ala-Ala-Arg(Pbf)-Asn(Trt)-Gln(Trt)-Ala-Ala-Thr(tBu)-Asn(Trt)-Ala-Gln(Trt)-Ile-Leu-Ala-His(Trt)-Val-Linker-MBHA Resin
Fmoc-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Lys(Boc)-Ala-Ala-Arg(Pbf)-Asn(Trt)-Gln(Trt)-Ala-Ala-Thr(tBu)-Asn(Trt)-Ala-Gln(Trt)-Ile-Leu-Ala-His(Trt)-Val-Linker-MBHA Resin
H2N-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Lys(Boc)-Ala-Ala-Arg(Pbf)-Asn(Trt)-Gln(Trt)-Ala-Ala-Thr(tBu)-Asn(Trt)-Ala-Gln(Trt)-Ile-Leu-Ala-His(Trt)-Val-Linker-MBHA Resin
Fmoc-Ala-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Lys(Boc)-Ala-Ala-Arg(Pbf)-Asn(Trt)-Gln(Trt)-Ala-Ala-Thr(tBu)-Asn(Trt)-Ala-Gln(Trt)-Ile-Leu-Ala-His(Trt)-Val-Linker-MBHA Resin
H2N-Ala-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Lys(Boc)-Ala-Ala-Arg(Pbf)-Asn(Trt)-Gln(Trt)-Ala-Ala-Thr(tBu)-Asn(Trt)-Ala-Gln(Trt)-Ile-Leu-Ala-His(Trt)-Val-Linker-MBHA Resin
Fmoc-Gln(Trt)-Ala-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Lys(Boc)-Ala-Ala-Arg(Pbf)-Asn(Trt)-Gln(Trt)-Ala-Ala-Thr(tBu)-Asn(Trt)-Ala-Gln(Trt)-Ile-Leu-Ala-His(Trt)-Val-Linker-MBHA Resin
H2N-Gln(Trt)-Ala-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Lys(Boc)-Ala-Ala-Arg(Pbf)-Asn(Trt)-Gln(Trt)-Ala-Ala-Thr(tBu)-Asn(Trt)-Ala-Gln(Trt)-Ile-Leu-Ala-His(Trt)-Val-Linker-MBHA Resin
Fmoc-Glu(OtBu)-Gln(Trt)-Ala-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Lys(Boc)-Ala-Ala-Arg(Pbf)-Asn(Trt)-Gln(Trt)-Ala-Ala-Thr(tBu)-Asn(Trt)-Ala-Gln(Trt)-Ile-Leu-Ala-His(Trt)-Val-Linker-MBHA Resin
H2N-Glu(OtBu)-Gln(Trt)-Ala-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Lys(Boc)-Ala-Ala-Arg(Pbf)-Asn(Trt)-Gln(Trt)-Ala-Ala-Thr(tBu)-Asn(Trt)-Ala-Gln(Trt)-Ile-Leu-Ala-His(Trt)-Val-Linker-MBHA Resin
Fmoc-Leu-Glu(OtBu)-Gln(Trt)-Ala-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Lys(Boc)-Ala-Ala-Arg(Pbf)-Asn(Trt)-Gln(Trt)-Ala-Ala-Thr(tBu)-Asn(Trt)-Ala-Gln(Trt)-Ile-Leu-Ala-His(Trt)-Val-Linker-MBHA Resin
H2N-Leu-Glu(OtBu)-Gln(Trt)-Ala-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Lys(Boc)-Ala-Ala-Arg(Pbf)-Asn(Trt)-Gln(Trt)-Ala-Ala-Thr(tBu)-Asn(Trt)-Ala-Gln(Trt)-Ile-Leu-Ala-His(Trt)-Val-Linker-MBHA Resin
Fmoc-Leu-Leu-Glu(OtBu)-Gln(Trt)-Ala-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Lys(Boc)-Ala-Ala-Arg(Pbf)-Asn(Trt)-Gln(Trt)-Ala-Ala-Thr(tBu)-Asn(Trt)-Ala-Gln(Trt)-Ile-Leu-Ala-His(Trt)-Val-Linker-MBHA Resin
H2N-Leu-Leu-Glu(OtBu)-Gln(Trt)-Ala-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Lys(Boc)-Ala-Ala-Arg(Pbf)-Asn(Trt)-Gln(Trt)-Ala-Ala-Thr(tBu)-Asn(Trt)-Ala-Gln(Trt)-Ile-Leu-Ala-His(Trt)-Val-Linker-MBHA Resin
Fmoc-Ile-Leu-Leu-Glu(OtBu)-Gln(Trt)-Ala-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Lys(Boc)-Ala-Ala-Arg(Pbf)-Asn(Trt)-Gln(Trt)-Ala-Ala-Thr(tBu)-Asn(Trt)-Ala-Gln(Trt)-Ile-Leu-Ala-His(Trt)-Val-Linker-MBHA Resin
H2N-Ile-Leu-Leu-Glu(OtBu)-Gln(Trt)-Ala-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Lys(Boc)-Ala-Ala-Arg(Pbf)-Asn(Trt)-Gln(Trt)-Ala-Ala-Thr(tBu)-Asn(Trt)-Ala-Gln(Trt)-Ile-Leu-Ala-His(Trt)-Val-Linker-MBHA Resin
Fmoc-Arg(Pbf)-Ile-Leu-Leu-Glu(OtBu)-Gln(Trt)-Ala-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Lys(Boc)-Ala-Ala-Arg(Pbf)-Asn(Trt)-Gln(Trt)-Ala-Ala-Thr(tBu)-Asn(Trt)-Ala-Gln(Trt)-Ile-Leu-Ala-His(Trt)-Val-Linker-MBHA Resin
H2N-Arg(Pbf)-Ile-Leu-Leu-Glu(OtBu)-Gln(Trt)-Ala-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Lys(Boc)-Ala-Ala-Arg(Pbf)-Asn(Trt)-Gln(Trt)-Ala-Ala-Thr(tBu)-Asn(Trt)-Ala-Gln(Trt)-Ile-Leu-Ala-His(Trt)-Val-Linker-MBHA Resin
Fmoc-Leu-Arg(Pbf)-Ile-Leu-Leu-Glu(OtBu)-Gln(Trt)-Ala-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Lys(Boc)-Ala-Ala-Arg(Pbf)-Asn(Trt)-Gln(Trt)-Ala-Ala-Thr(tBu)-Asn(Trt)-Ala-Gln(Trt)-Ile-Leu-Ala-His(Trt)-Val-Linker-MBHA Resin
H2N-Leu-Arg(Pbf)-Ile-Leu-Leu-Glu(OtBu)-Gln(Trt)-Ala-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Lys(Boc)-Ala-Ala-Arg(Pbf)-Asn(Trt)-Gln(Trt)-Ala-Ala-Thr(tBu)-Asn(Trt)-Ala-Gln(Trt)-Ile-Leu-Ala-His(Trt)-Val-Linker-MBHA Resin
Fmoc-Leu-Leu-Arg(Pbf)-Ile-Leu-Leu-Glu(OtBu)-Gln(Trt)-Ala-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Lys(Boc)-Ala-Ala-Arg(Pbf)-Asn(Trt)-Gln(Trt)-Ala-Ala-Thr(tBu)-Asn(Trt)-Ala-Gln(Trt)-Ile-Leu-Ala-His(Trt)-Val-Linker-MBHA Resin
H2N-Leu-Leu-Arg(Pbf)-Ile-Leu-Leu-Glu(OtBu)-Gln(Trt)-Ala-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Lys(Boc)-Ala-Ala-Arg(Pbf)-Asn(Trt)-Gln(Trt)-Ala-Ala-Thr(tBu)-Asn(Trt)-Ala-Gln(Trt)-Ile-Leu-Ala-His(Trt)-Val-Linker-MBHA Resin
Fmoc-Gly-Leu-Leu-Arg(Pbf)-Ile-Leu-Leu-Glu(OtBu)-Gln(Trt)-Ala-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Lys(Boc)-Ala-Ala-Arg(Pbf)-Asn(Trt)-Gln(Trt)-Ala-Ala-Thr(tBu)-Asn(Trt)-Ala-Gln(Trt)-Ile-Leu-Ala-His(Trt)-Val-Linker-MBHA Resin
H2N-Gly-Leu-Leu-Arg(Pbf)-Ile-Leu-Leu-Glu(OtBu)-Gln(Trt)-Ala-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Lys(Boc)-Ala-Ala-Arg(Pbf)-Asn(Trt)-Gln(Trt)-Ala-Ala-Thr(tBu)-Asn(Trt)-Ala-Gln(Trt)-Ile-Leu-Ala-His(Trt)-Val-Linker-MBHA Resin
Fmoc-Ile-Gly-Leu-Leu-Arg(Pbf)-Ile-Leu-Leu-Glu(OtBu)-Gln(Trt)-Ala-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Lys(Boc)-Ala-Ala-Arg(Pbf)-Asn(Trt)-Gln(Trt)-Ala-Ala-Thr(tBu)-Asn(Trt)-Ala-Gln(Trt)-Ile-Leu-Ala-His(Trt)-Val-Linker-MBHA Resin
H2N-Ile-Gly-Leu-Leu-Arg(Pbf)-Ile-Leu-Leu-Glu(OtBu)-Gln(Trt)-Ala-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Lys(Boc)-Ala-Ala-Arg(Pbf)-Asn(Trt)-Gln(Trt)-Ala-Ala-Thr(tBu)-Asn(Trt)-Ala-Gln(Trt)-Ile-Leu-Ala-His(Trt)-Val-Linker-MBHA Resin
Fmoc-Pro-Ile-Gly-Leu-Leu-Arg(Pbf)-Ile-Leu-Leu-Glu(OtBu)-Gln(Trt)-Ala-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Lys(Boc)-Ala-Ala-Arg(Pbf)-Asn(Trt)-Gln(Trt)-Ala-Ala-Thr(tBu)-Asn(Trt)-Ala-Gln(Trt)-Ile-Leu-Ala-His(Trt)-Val-Linker-MBHA Resin
H2N-Pro-Ile-Gly-Leu-Leu-Arg(Pbf)-Ile-Leu-Leu-Glu(OtBu)-Gln(Trt)-Ala-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Lys(Boc)-Ala-Ala-Arg(Pbf)-Asn(Trt)-Gln(Trt)-Ala-Ala-Thr(tBu)-Asn(Trt)-Ala-Gln(Trt)-Ile-Leu-Ala-His(Trt)-Val-Linker-MBHA Resin
Fmoc-Val-Pro-Ile-Gly-Leu-Leu-Arg(Pbf)-Ile-Leu-Leu-Glu(OtBu)-Gln(Trt)-Ala-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Lys(Boc)-Ala-Ala-Arg(Pbf)-Asn(Trt)-Gln(Trt)-Ala-Ala-Thr(tBu)-Asn(Trt)-Ala-Gln(Trt)-Ile-Leu-Ala-His(Trt)-Val-Linker-MBHA Resin
H2N-Val-Pro-Ile-Gly-Leu-Leu-Arg(Pbf)-Ile-Leu-Leu-Glu(OtBu)-Gln(Trt)-Ala-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Lys(Boc)-Ala-Ala-Arg(Pbf)-Asn(Trt)-Gln(Trt)-Ala-Ala-Thr(tBu)-Asn(Trt)-Ala-Gln(Trt)-Ile-Leu-Ala-His(Trt)-Val-Linker-MBHA Resin
Fmoc-Asp(OtBu)-Val-Pro-Ile-Gly-Leu-Leu-Arg(Pbf)-Ile-Leu-Leu-Glu(OtBu)-Gln(Trt)-Ala-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Lys(Boc)-Ala-Ala-Arg(Pbf)-Asn(Trt)-Gln(Trt)-Ala-Ala-Thr(tBu)-Asn(Trt)-Ala-Gln(Trt)-Ile-Leu-Ala-His(Trt)-Val-Linker-MBHA Resin
H2N-Asp(OtBu)-Val-Pro-Ile-Gly-Leu-Leu-Arg(Pbf)-Ile-Leu-Leu-Glu(OtBu)-Gln(Trt)-Ala-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Lys(Boc)-Ala-Ala-Arg(Pbf)-Asn(Trt)-Gln(Trt)-Ala-Ala-Thr(tBu)-Asn(Trt)-Ala-Gln(Trt)-Ile-Leu-Ala-His(Trt)-Val-Linker-MBHA Resin
Fmoc-Leu-Asp(OtBu)-Val-Pro-Ile-Gly-Leu-Leu-Arg(Pbf)-Ile-Leu-Leu-Glu(OtBu)-Gln(Trt)-Ala-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Lys(Boc)-Ala-Ala-Arg(Pbf)-Asn(Trt)-Gln(Trt)-Ala-Ala-Thr(tBu)-Asn(Trt)-Ala-Gln(Trt)-Ile-Leu-Ala-His(Trt)-Val-Linker-MBHA Resin
H2N-Leu-Asp(OtBu)-Val-Pro-Ile-Gly-Leu-Leu-Arg(Pbf)-Ile-Leu-Leu-Glu(OtBu)-Gln(Trt)-Ala-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Lys(Boc)-Ala-Ala-Arg(Pbf)-Asn(Trt)-Gln(Trt)-Ala-Ala-Thr(tBu)-Asn(Trt)-Ala-Gln(Trt)-Ile-Leu-Ala-His(Trt)-Val-Linker-MBHA Resin
Fmoc-Ser(tBu)-Leu-Asp(OtBu)-Val-Pro-Ile-Gly-Leu-Leu-Arg(Pbf)-Ile-Leu-Leu-Glu(OtBu)-Gln(Trt)-Ala-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Lys(Boc)-Ala-Ala-Arg(Pbf)-Asn(Trt)-Gln(Trt)-Ala-Ala-Thr(tBu)-Asn(Trt)-Ala-Gln(Trt)-Ile-Leu-Ala-His(Trt)-Val-Linker-MBHA Resin
H2N-Ser(tBu)-Leu-Asp(OtBu)-Val-Pro-Ile-Gly-Leu-Leu-Arg(Pbf)-Ile-Leu-Leu-Glu(OtBu)-Gln(Trt)-Ala-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Lys(Boc)-Ala-Ala-Arg(Pbf)-Asn(Trt)-Gln(Trt)-Ala-Ala-Thr(tBu)-Asn(Trt)-Ala-Gln(Trt)-Ile-Leu-Ala-His(Trt)-Val-Linker-MBHA Resin
Fmoc-Leu-Ser(tBu)-Leu-Asp(OtBu)-Val-Pro-Ile-Gly-Leu-Leu-Arg(Pbf)-Ile-Leu-Leu-Glu(OtBu)-Gln(Trt)-Ala-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Lys(Boc)-Ala-Ala-Arg(Pbf)-Asn(Trt)-Gln(Trt)-Ala-Ala-Thr(tBu)-Asn(Trt)-Ala-Gln(Trt)-Ile-Leu-Ala-His(Trt)-Val-Linker-MBHA Resin
H2N-Leu-Ser(tBu)-Leu-Asp(OtBu)-Val-Pro-Ile-Gly-Leu-Leu-Arg(Pbf)-Ile-Leu-Leu-Glu(OtBu)-Gln(Trt)-Ala-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Lys(Boc)-Ala-Ala-Arg(Pbf)-Asn(Trt)-Gln(Trt)-Ala-Ala-Thr(tBu)-Asn(Trt)-Ala-Gln(Trt)-Ile-Leu-Ala-His(Trt)-Val-Linker-MBHA Resin
Fmoc-Ile-Leu-Ser(tBu)-Leu-Asp(OtBu)-Val-Pro-Ile-Gly-Leu-Leu-Arg(Pbf)-Ile-Leu-Leu-Glu(OtBu)-Gln(Trt)-Ala-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Lys(Boc)-Ala-Ala-Arg(Pbf)-Asn(Trt)-Gln(Trt)-Ala-Ala-Thr(tBu)-Asn(Trt)-Ala-Gln(Trt)-Ile-Leu-Ala-His(Trt)-Val-Linker-MBHA Resin
H2N-Ile-Leu-Ser(tBu)-Leu-Asp(OtBu)-Val-Pro-Ile-Gly-Leu-Leu-Arg(Pbf)-Ile-Leu-Leu-Glu(OtBu)-Gln(Trt)-Ala-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Lys(Boc)-Ala-Ala-Arg(Pbf)-Asn(Trt)-Gln(Trt)-Ala-Ala-Thr(tBu)-Asn(Trt)-Ala-Gln(Trt)-Ile-Leu-Ala-His(Trt)-Val-Linker-MBHA Resin
Fmoc-Val-Ile-Leu-Ser(tBu)-Leu-Asp(OtBu)-Val-Pro-Ile-Gly-Leu-Leu-Arg(Pbf)-Ile-Leu-Leu-Glu(OtBu)-Gln(Trt)-Ala-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Lys(Boc)-Ala-Ala-Arg(Pbf)-Asn(Trt)-Gln(Trt)-Ala-Ala-Thr(tBu)-Asn(Trt)-Ala-Gln(Trt)-Ile-Leu-Ala-His(Trt)-Val-Linker-MBHA Resin
以上中间结构，均可在专肽生物多肽计算器-多肽结构计算器中，一键画出。
最后再经过步骤二得到 H2N-Val-Ile-Leu-Ser(tBu)-Leu-Asp(OtBu)-Val-Pro-Ile-Gly-Leu-Leu-Arg(Pbf)-Ile-Leu-Leu-Glu(OtBu)-Gln(Trt)-Ala-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Lys(Boc)-Ala-Ala-Arg(Pbf)-Asn(Trt)-Gln(Trt)-Ala-Ala-Thr(tBu)-Asn(Trt)-Ala-Gln(Trt)-Ile-Leu-Ala-His(Trt)-Val-Linker-MBHA Resin，结构如下：
5、切割：6倍树脂体积的切割液（或每1g树脂加8ml左右的切割液），摇床摇晃 2小时，过滤掉树脂，用冰无水乙醚沉淀滤液，并用冰无水乙醚洗涤沉淀物3次，最后将沉淀物放真空干燥釜中，常温干燥24小试，得到粗品H2N-Val-Ile-Leu-Ser-Leu-Asp-Val-Pro-Ile-Gly-Leu-Leu-Arg-Ile-Leu-Leu-Glu-Gln-Ala-Arg-Tyr-Lys-Ala-Ala-Arg-Asn-Gln-Ala-Ala-Thr-Asn-Ala-Gln-Ile-Leu-Ala-His-Val-NH2。结构图见产品结构图。
切割液选择：1）TFA：H2O=95%：5%
2）TFA：H2O：TIS=95%：2.5%：2.5%
3）三氟乙酸：茴香硫醚：1，2-乙二硫醇：苯酚：水=87.5%：5%：2.5%：2.5%：2.5%
（前两种适合没有容易氧化的氨基酸，例如Trp、Cys、Met。第三种适合几乎所有的序列。）
6、纯化冻干：使用液相色谱纯化，收集目标峰液体，进行冻干，获得蓬松的粉末状固体多肽。不过这时要取小样复测下纯度 是否目标纯度。
7、最后总结：
杭州专肽生物技术有限公司（ALLPEPTIDE https://www.allpeptide.com）主营定制多肽合成业务，提供各类长肽，短肽，环肽，提供各类修饰肽，如：荧光标记修饰（CY3、CY5、CY5.5、CY7、FAM、FITC、Rhodamine B、TAMRA等），功能基团修饰肽（叠氮、炔基、DBCO、DOTA、NOTA等），同位素标记肽（N15、C13），订书肽（Stapled Peptide）,脂肪酸修饰肽（Pal、Myr、Ste），磷酸化修饰肽（P-Ser、P-Thr、P-Tyr），环肽（酰胺键环肽、一对或者多对二硫键环），生物素标记肽，PEG修饰肽，甲基化修饰肽等。
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