来自人类流感血凝素 (HA) 的由九个氨基酸组成的多肽。HA Peptide 广泛用于细胞生物学和生物化学中分离，纯化，检测和追踪目标蛋白。
编号：131083
CAS号：92000-76-5
单字母：H2N-YPYDVPDYA-OH
| 编号: | 131083 |
| 中文名称: | 多肽标签HA Peptide |
| 英文名: | HA 12CA5 Epitope |
| CAS号: | 92000-76-5 |
| 单字母: | H2N-YPYDVPDYA-OH |
| 三字母: | H2N N端氨基 -Tyr酪氨酸 -Pro脯氨酸 -Tyr酪氨酸 -Asp天冬氨酸 -Val缬氨酸 -Pro脯氨酸 -Asp天冬氨酸 -Tyr酪氨酸 -Ala丙氨酸 -OHC端羧基 |
| 氨基酸个数: | 9 |
| 分子式: | C53H67N9O17 |
| 平均分子量: | 1102.15 |
| 精确分子量: | 1101.47 |
| 等电点(PI): | 9.84 |
| pH=7.0时的净电荷数: | 1.97 |
| 酸性基团个数: | -2 |
| 碱性基团个数: | 疏水 |
| 平均亲水性: | -0.88571428571429 |
| 疏水性值: | -0.77 |
| 外观与性状: | 白色粉末状固体 |
| 闪点: | 3840 M-1cm-1 |
| 消光系数: | 4470 |
| 来源: | 人工化学合成，仅限科学研究使用，不得用于人体。 |
| 纯度: | 95%、98% |
| 盐体系: | 可选TFA、HAc、HCl或其它 |
| 储存条件: | 负80℃至负20℃ |
| 标签: | 多肽标签(Tag) |
HA源于流感病毒红细胞凝集素表面抗原决定簇对目标蛋白的空间结构影响小。
HA Peptide (HA tag) 是来自人类流感血凝素 (HA) 的由九个氨基酸组成的多肽。HA Peptide 广泛用于细胞生物学和生物化学中分离，纯化，检测和追踪目标蛋白。
HA Peptide (HA tag) is a nine amino acids peptide derived from the human influenza hemagglutinin (HA). HA Peptide is extensively used to isolate, purify, detect, and track the protein of interest in cell biology and biochemistry.
HA标签复合体由质粒DNA、转铁蛋白 - 聚赖氨酸和流感病毒血凝素HA-2亚基N端序列衍生的聚赖氨酸共轭肽共同组成，用于将荧光素酶或β-半乳糖苷酶标记的基因转移进K562细胞、HeLa细胞和BNL CL.2肝细胞。DNA复合体中HA共轭多肽的存在使得该复合体可以破坏膜结构，使转铁蛋白 - 聚赖氨酸介导基因转移进入细胞[1]。
在流感病毒中，血凝素（HA）蛋白介导病毒与细胞表面的结合以及随后的病毒与细胞膜的融合。HA由受体结合亚单位HA1和膜融合亚单位HA2组成。病毒表面存在的HA1yHA2复合体是无活性的，膜融合是由HA蛋白的构象状态所调控的。当细胞内体处于酸性环境时，HA蛋白从天然构象（非膜融合）转换成融合活性（膜融合）的构象。HA的天然结构处于一种亚稳定的状态，对天然结构进行去稳定化后得到膜融合构象[2]。
专肽生物可以提供常见抗体制备、免疫学研究等生物科研需求的各类标签多肽（Tag peptide）以及蛋白底物产品，可用荧光标记(FITC、5-Fam)等。除常见抗体中抗原决定部位的标签多肽（tag: His | c-Myc | HA | FLAG | V5 | X-press | VSV tag | T7 tag | Snoop tag | E-tag | Sof tag 1 | Spy tag |等等），我们还提供各类定制标签肽的合成，并可提供荧光标记(FITC、5-Fam)等。同时，免费提供的MS和HPLC分析报告。
| DOI | 名称 | |
|---|---|---|
| 10.1155/2013/581093 | Several affinity tags commonly used in chromatographic purification | 下载 |
| 10.1007/s10529-012-0966-8 | A new idea for simple and rapid monitoring of gene expression: requirement of nucleotide sequences encoding an N-terminal HA tag in the T7 promoter-driven expression in E. coli | 下载 |
| 10.1038/nmeth0207-107 | The HA tag is cleaved and loses immunoreactivity during apoptosis | 下载 |
| 10.1007/s00784-018-2701-x | A novel hydroxyapatite-binding antimicrobial peptide against oral biofilms | 下载 |
| 10.1021/acs.langmuir.9b03856 | Zwitterionic Peptide Enhances Protein-Resistant Performance of Hyaluronic Acid-Modified Surfaces | 下载 |
| 10.1002/jbm.b.32648 | Surface immobilization of MEPE peptide onto HA/β-TCP ceramic particles enhances bone regeneration and remodeling | 下载 |
| 10.1016/j.matbio.2018.01.021 | Design of peptide mimetics to block pro-inflammatory functions of HA fragments | 下载 |
| 10.1016/j.bmc.2021.116132 | Amphiphilic peptide-based MMP3 inhibitors for intra-articular treatment of knee OA | 下载 |
多肽H2N-Tyr-Pro-Tyr-Asp-Val-Pro-Asp-Tyr-Ala-COOH的合成步骤：
1、合成CTC树脂：称取2.3g CTC Resin（如初始取代度约为0.58mmol/g）和1.6mmol Fmoc-Ala-OH于反应器中，加入适量DCM溶解氨基酸（需要注意，此时CTC树脂体积会增大好几倍，避免DCM溶液过少），再加入4.0mmol DIPEA（Mw：129.1,d：0.740g/ml），反应2-3小时后，可不抽滤溶液，直接加入1ml的HPLC级甲醇，封端半小时。依次用DMF洗涤2次，甲醇洗涤1次，DCM洗涤一次，甲醇洗涤一次，DCM洗涤一次，DMF洗涤2次（这里使用甲醇和DCM交替洗涤，是为了更好地去除其他溶质，有利于后续反应）。得到 Fmoc-Ala-CTC Resin。结构图如下：
2、脱Fmoc：加3倍树脂体积的20%Pip/DMF溶液，鼓氮气30分钟，然后2倍树脂体积的DMF 洗涤5次。得到 H2N-Ala-CTC Resin 。（此步骤脱除Fmoc基团，茚三酮检测为蓝色，Pip为哌啶）。结构图如下：
3、缩合：取4.0mmol Fmoc-Tyr(tBu)-OH 氨基酸，加入到上述树脂里，加适当DMF溶解氨基酸，再依次加入8.0mmol DIPEA，3.8mmol HBTU。反应30分钟后，取小样洗涤，茚三酮检测为无色。用2倍树脂体积的DMF 洗涤3次树脂。（洗涤树脂，去掉残留溶剂，为下一步反应做准备）。得到Fmoc-Tyr(tBu)-Ala-CTC Resin。氨基酸：DIPEA：HBTU：树脂=3：6：2.85：1（摩尔比）。结构图如下：
4、依次循环步骤二、步骤三，依次得到
H2N-Tyr(tBu)-Ala-CTC Resin
Fmoc-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-CTC Resin
H2N-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-CTC Resin
Fmoc-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-CTC Resin
H2N-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-CTC Resin
Fmoc-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-CTC Resin
H2N-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-CTC Resin
Fmoc-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-CTC Resin
H2N-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-CTC Resin
Fmoc-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-CTC Resin
H2N-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-CTC Resin
Fmoc-Pro-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-CTC Resin
H2N-Pro-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-CTC Resin
Fmoc-Tyr(tBu)-Pro-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-CTC Resin
以上中间结构，均可在专肽生物多肽计算器-多肽结构计算器中，一键画出。
最后再经过步骤二得到 H2N-Tyr(tBu)-Pro-Tyr(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Pro-Asp(OtBu)-Tyr(tBu)-Ala-CTC Resin，结构如下：
5、切割：6倍树脂体积的切割液（或每1g树脂加8ml左右的切割液），摇床摇晃 2小时，过滤掉树脂，用冰无水乙醚沉淀滤液，并用冰无水乙醚洗涤沉淀物3次，最后将沉淀物放真空干燥釜中，常温干燥24小试，得到粗品H2N-Tyr-Pro-Tyr-Asp-Val-Pro-Asp-Tyr-Ala-COOH。结构图见产品结构图。
切割液选择：1）TFA：H2O=95%：5%、TFA：H2O=97.5%：2.5%
2）TFA：H2O：TIS=95%：2.5%：2.5%
3）三氟乙酸：茴香硫醚：1，2-乙二硫醇：苯酚：水=87.5%：5%：2.5%：2.5%：2.5%
（前两种适合没有容易氧化的氨基酸，例如Trp、Cys、Met。第三种适合几乎所有的序列。）
6、纯化冻干：使用液相色谱纯化，收集目标峰液体，进行冻干，获得蓬松的粉末状固体多肽。不过这时要取小样复测下纯度 是否目标纯度。
7、最后总结：
杭州专肽生物技术有限公司（ALLPEPTIDE https://www.allpeptide.com）主营定制多肽合成业务，提供各类长肽，短肽，环肽，提供各类修饰肽，如：荧光标记修饰（CY3、CY5、CY5.5、CY7、FAM、FITC、Rhodamine B、TAMRA等），功能基团修饰肽（叠氮、炔基、DBCO、DOTA、NOTA等），同位素标记肽（N15、C13），订书肽（Stapled Peptide）,脂肪酸修饰肽（Pal、Myr、Ste），磷酸化修饰肽（P-Ser、P-Thr、P-Tyr），环肽（酰胺键环肽、一对或者多对二硫键环），生物素标记肽，PEG修饰肽，甲基化修饰肽
以上所有内容，为专肽生物原创内容，请勿发布到其他网站上。
